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2019 Fiscal Year Annual Research Report

Ultra-High Resolution Protein Analysis Using a Chemical Labeling Method

Research Project

Project/Area Number 17H03090
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

王子田 彰夫  九州大学, 薬学研究院, 教授 (10343328)

Project Period (FY) 2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords蛋白質 / 電子顕微鏡 / ケミカルバイオロジー / 脳神経科学
Outline of Annual Research Achievements

Aspリッチタグを用いたリアクティブタグ法の開発においては、金ナノ粒子とラベル化分子を直接コンジュゲートさせたプローブを作製、これを用いて細胞表層に発現させた受容体タンパク質のラベル化に成功した。本プローブを用いたラベル化効率は、従来からの抗体を用いた免疫電験法よりも高いラベル化効率を持つことを証明することができた。また、ブラジキニン受容体クラスターの電子顕微鏡イメージングにも成功した。これらの新しいデータを含めた成果を論文としてまとめて発表することができた。また、マウス脳内に発現させたタグ導入タンパク質のラベル化については、クリック反応による金ナノ粒子修飾を目指して組織透過性に優れたアジド型プローブを用いたラベル化研究を新たに開始した。本プローブを合成後にオーストリアISTの重本研において反応条件の検討を行っている段階にある。
ヒスタグリアクティブタグの開発においては、プローブ分子を新たに合成して重本研に送付、現在、細胞表層の受容体タンパク質のラベル化について種々の検討を進めている段階にある。一方でヒスタグリアクティブタグの細胞表層での非特異反応についてケミカルプロテオミクスの手法を用いて評価を行うことを目的とした研究に新たに着手した。本年度は、非特異ラベル化された膜タンパク質のゲル電気泳動による評価、非特異ラベル化された膜タンパクの濃縮方法について検討を行った。本研究で得た成果は、電子顕微鏡解析はじめとする様々なケミカルラベル化のタンパク質機能解析応用について重要な知見を与えると期待できる。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (8 results)

All 2020 2019 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (4 results) Remarks (1 results)

  • [Int'l Joint Research] IST Austria(オーストラリア)

    • Country Name
      AUSTRALIA
    • Counterpart Institution
      IST Austria
  • [Journal Article] ペプチドデザインによるタンパク質1分子レベルの電子顕微鏡解析2020

    • Author(s)
      王子田 彰夫
    • Journal Title

      Peptide Newsletter Japan

      Volume: 116 Pages: 1-4

  • [Journal Article] Electron Microscopic Detection of Single Membrane Proteins by a Specific Chemical Labeling2019

    • Author(s)
      7.Shigekazu Tabata, Marijo Jevtic, Nobutaka Kurashige, Hirokazu Fuchida, Munetsugu Kido, Kazushi Tani, Naoki Zenmyo, Shohei Uchinomiya, Harumi Harada, Makoto Itakura, Itaru Hamachi, Ryuichi Shigemoto, Akio Ojida
    • Journal Title

      iScience

      Volume: 22 Pages: 256-268

    • DOI

      10.1016/j.isci.2019.11.025

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] TEMイメージングを目指したリアクティブタグシステムの開発2019

    • Author(s)
      善明直輝、得丸祥貴、田畑栄一、内之宮祥平、重本隆一、王子田彰夫
    • Organizer
      日本ケミカルバイオロジー学会第14回年会
  • [Presentation] 高選択的Cys-Hisタグケミカルラベリングの最適化とイメージング応用2019

    • Author(s)
      善明直輝, 得丸祥貴, 内之宮祥平, 田畑栄一, 王子田彰夫
    • Organizer
      生体機能関連化学部会若手の会 第31回サマースクール
  • [Presentation] タンパク質高解像度解析のためのHis-tagケミカルラベル化法の開発2019

    • Author(s)
      得丸祥貴, 善明直輝, 内之宮祥平, 王子田彰夫
    • Organizer
      第56回化学関連支部合同九州大会
  • [Presentation] タンパク質電子顕微鏡イメージングへの適応を目指したHis-tag高選択的ケミカルラベル化法の開発2019

    • Author(s)
      得丸祥貴, 善明直輝, 内之宮祥平, 王子田彰夫
    • Organizer
      第36回日本薬学会九州支部大会
  • [Remarks] 九州大学薬学研究院ケミカルバイオロジー研究室ホームページ

    • URL

      http://bunseki.phar.kyushu-u.ac.jp

URL: 

Published: 2021-01-27  

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