2019 Fiscal Year Annual Research Report
大腸がんの形成及び治療薬抵抗性獲得に関わるドライバー遺伝子の同定
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17H03586
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| Research Institution | National Cancer Center Japan |
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Principal Investigator |
武田 はるな 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, ユニット長 (80647975)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | オルガノイド / 大腸がん抑制遺伝子 / CRISPR-Cas9 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1.前年度の研究でアクチビン受容体とTGF-b受容体が協調的に大腸がん形成を抑制していることを実験的に検証したので、本年度はその分子機構を解析した。アクチビン受容体とTGF-b受容体はSmad2をリン酸化し転写制御を行うなど、機能の一部が重複している。そこで、この二つの受容体の腫瘍抑制作用がSmad2 を介しているかを免疫染色により解析した。リン酸化Smad2陽性腫瘍細胞の割合は、TGF-b受容体のみがノックアウトされている場合と比べ、二つの受容体がノックアウトされている場合において優位に低かった。この結果より二つの受容体はSmad2を介して協調的に腫瘍抑制機能を示していることが明らかにされた。次に、アクチビン受容体のリガンドのひとつであるアクチビンの大腸腫瘍上皮細胞への作用に関して解析した。アクチビンをマウス腫瘍上皮オルガノイドの培養液中に添加するとオルガノイドの増殖が阻害され、Smad2のリン酸化は増加した。しかし、アクチビンの受容体を欠損させたオルガノイドにおいて増殖阻害作用は見られなかった。これらの結果より、大腸の腫瘍細胞はアクチビンの増殖抑制作用を回避するためにアクチビン受容体の変異を獲得すると考えられた。以上の結果を論文にまとめ発表した。
2.前年度の研究により得た細胞からゲノムを抽出し、ゲノム解析用のライブラリを調整した。次世代シーケンサー解読と情報解析によりSBトランスポゾン挿入部位を同定し、候補遺伝子をいくつか得ることができた。
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| Research Progress Status |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] CRISPR-Cas9-mediated gene knockout in intestinal tumor organoids provides functional validation for colorectal cancer driver genes.2019
Author(s)
1. Takeda H, Kataoka S, Nakayama M, Ali MAE, Oshima H, Yamamoto D, Park JW, Takegami Y, An T, Jenkins NA, Copeland NG, Oshima M.
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Journal Title
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
Volume: 116
Pages: 15635-15644
DOI
Peer Reviewed
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