2017 Fiscal Year Annual Research Report
リアノジン受容体結合カルモジュリン制御による心不全・心肥大・不整脈の包括的治療
| Project/Area Number |
17H04178
|
|---|
| Research Institution | Yamaguchi University |
|---|
Principal Investigator |
矢野 雅文 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (90294628)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 健 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (50363122)
小林 茂樹 山口大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (90397993)
小田 哲郎 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (40569290)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| Keywords | EC coupling / リアノジン受容体 / カルモジュリン / 心肥大 / 心不全 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
WTマウスおよびCaM HAマウスにおけるMI作成後の解析: WTマウス、CaM HAマウスに対してLADの結紮によるMI作成を行う。MI作成4、8週間後に心エコーにて左室径・壁厚、fractional shorteningを計測した後、エピネフリン/運動負荷による不整脈誘発試験を行う。さらに、心筋細胞を単離培養し、①Ca2+ transient、SR Ca2+ content、Ca2+ spark、cell shortening；②anti-CaM, anti-GRK5, anti-HDAC4,5, anti-p-HDAC4,5の抗体を用いた免疫染色によるCaM, HDAC, GRK5の核・細胞質内分布、リン酸化HDACの割合および心肥大関連遺伝子（c-fos, c-jun）の発現；③RyR2に対するCaM結合能などを測定する。その結果、WTマウスに対するダントロレン慢性投与群、CaM HAモデル群ともに、MI作成後にみられるカテコラミン負荷誘発性の心室頻拍が抑制され、左室リモデリング、心筋細胞肥大も抑制され、心筋細胞内Ca2+ sparkの増大（Ca2+漏出）、cell shorteningの低下、Ca2+ transientの低下も抑制され、予後は著明に改善した。
GRK5のknock-downによる心肥大抑制効果の解析：マウスの新生児培養心筋細胞を用いて、siRNAを用いたGRK5のknock-downを行い、エンドセリン（ET）による刺激でみられるCaMの核内移行と心筋肥大が、抑制されるかを観察する。その結果GRK5のknock-downはCaMの核内移行を抑制することが確認された。
臨床研究アーム：ダントロレンの心不全・重症不整脈に対する有効性を証明する多施設共同二重盲検ランダム化比較試験を開始した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
CaM HAマウスにおけるMI作成後の解析が予定通り進んでいる。さらにGRK5のknock-downも肥大抑制効果を示した。臨床研究アームにおいてもダントロレンの心不全・重症不整脈に対する有効性を証明する多施設共同二重盲検ランダム化比較試験を開始するなど、ほぼ計画通りに進んでいる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後変異GRK5（GRK5内にある核局在シグナルのdeletion、CaM結合ドメインのdeletion）のトランスフェクションを行いET刺激後にCaMの核内移行、心筋細胞肥大が抑制されるかを観察する。
ダントロレンの心不全・重症不整脈に対する有効性を証明する多施設共同二重盲検ランダム化比較試験（RCT）の症例数を増やす。
|
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Channel Pore Mutation of RyR2 Cause Calcium Leak Independent of FKBP12.6-RyR2 and Calmodulin-RyR2 Affinity in R4496C/+ Knock-in Mouse2017
Author(s)
Hitoshi Uchinoumi, Ivanita Stefanon, Yi Yang, Mena Said, Xiaoqiong Dong, Rogerio Faustino, Jose L Puglisi, Ye Chen-Izu, Razvan L Cornea, Xander H Wehrens, Wayne S Chen, Takeshi Yamamoto, Yano Masafumi and Donald M Bers
Organizer
90th Scientific Session of American Heart Association
-
[Presentation] Effect of Site Dependent RyR Stabilizers; a Clue to Trace a Signal Transmission Pathway Inside the RyR Molecule2017
Author(s)
Go Fukui, Takeshi Yamamoto, Michiaki Kono, Yoshihide Nakamura, Takuma Nanno, Yoriomi Hamada, Yoko Sufu, Hironori Ishiguchi, Shigehiko Nishimura, Hitoshi Uchinoumi, Tetsuro Oda, Shinichi Okuda, Shigeki Kobayashi and Masafumi Yano
Organizer
90th Scientific Session of American Heart Association
-
[Presentation] Dantrolene Prevents Right Ventricular Hypertrophy Without Reducing Pulmonary Arterial Pressure In Monocrotaline-induced PAH In Mice2017
Author(s)
Yoshihide Nakamura, Takeshi Yamamoto, Michiaki kono, Yoriomi Hamada, Go Fukui, Yoko Sufu, Takuma Nanno, Hironori Ishiguchi, Shigehiko Nishimura, Tetsuro Oda, Shinichi Okuda, Shigeki Kobayashi, Masafumi Yano
Organizer
90th Scientific Session of American Heart Association
