Identification of miRNA which rescues EBF1 deficiency indispensable for B cell lineage commitment

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17H04212
• Research Institution: Tokai University
• Principal Investigator: 幸谷 愛 東海大学, 医学部, 教授 (00517477)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 穂積 勝人 東海大学, 医学部, 教授 (30246079) ; 伊川 友活 東京理科大学, 研究推進機構生命医科学研究所, 教授 (60450392) ; 大塚 正人 東海大学, 医学部, 教授 (90372945)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: B細胞分化 / EBF1 / microRNA

Outline of Annual Research Achievements

miR-195がEBF1欠損造血前駆細胞におけるB細胞欠損をレスキューすることを、E B F１欠損造血前駆細胞にmiR-195をレトロウィルスによって導入し、T細胞B細胞を持たない免疫不全マウスに骨髄移植する系で証明してきたが、より、確実性の高い方法で上記の現象を明らかにするために、miR-195トランジェニックマウスを作成し、miR-195 Tg
とvav-CreマウスとEBF1 flox KOマウスの交配を行った。交配が終了したマウスに対して、解析を行ったところ、骨髄においてCD19陽性細胞が認められたため、EBF1欠損マウスで認められるB細胞欠損をmiR-195がレスキューすることが、改めて証明された。また上記細胞に対してATAC-seqを行ったところ、B細胞運命決定で重要とされる転写因子のプロモーター領域においてEBF1欠損細胞ではクローズしているクロマチン領域がmiR-195ではオープンになっていることが明らかになった。
しかしながら、マウスが不妊となり、マウスの数を増やしての上記の確認が不能となった。この理由としては、Vav-Creが生殖系列にリークしていることが考えられた。そこで、現在戻し交配を行い、Vav-CreとEBF1 flox ヘテロマウスでの交配を進めている。
miR-195欠損マウスにおいてリンパ球分化、B細胞分化に異常が認められており、トランスジェニックマウスの結果を支持する結果が得られた。
再現性が認められ次第論文化の予定である。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] PD-L1 is induced on hepatocyte surface via CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 6 upregulation by the anti-HBV drug Entecavir (2020)
  • Author(s): 1)Yamamoto Y, Kakisaki M,Kotaki R, Kurosaki N, Chiba T, Ando K,Shimizu T,Aoki T, Chamoto K,Kagawa T, *Kotani A
  • Journal Title: International Immunology Volume: in press Pages: -
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dasatinib exacerbates splenomegaly of mice inoculated with Epstein-Barr virus-infected lymphoblastoid cell lines. (2020)
  • Author(s): 2)Kotaki R, Kawashima M, Yamamoto Y, Higuchi H, Nagashima E, Kurosaki N, Takamatsu M, Kikuti YY, Imadome KI, Nakamura N, *Kotani A.
  • Journal Title: Sci Rep. Volume: 10(1): Pages: 4355
  • DOI: doi: 10.1038/s41598-020-61300-y.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] .Butyric Acid in Saliva of Chronic Periodontitis Patients Induces Transcription of the EBV Lytic Switch Activator BZLF1: A Pilot Study. (2020)
  • Author(s): Koike R, Nodomi K, Watanabe N, Ogata Y, Takeichi O, Takei M, Kaneko T, Tonogi M, Kotani A, Imai K
  • Journal Title: In Vivo. Volume: 34(2) Pages: 587-594
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PD-L1/L2 protein levels rapidly increase on monocytes via trogocytosis from tumor cells in classical Hodgkin lymphoma. (2020)
  • Author(s): Kawashima M, Carreras M, Higuchi H, Kotaki R, Hoshina T, Kawai Y, Okuyama K, Suzuki N, Kakizaki M, Miyatake Y, Ando K, Nakayama M, Umezu S, Horie R, Higuchi Y, Katagiri K, Goyama S, Kitamura T, Chamoto K, Yano S, Nakamura N, and * Kotani A.
  • Journal Title: Leukemia Volume: Feb24 Pages: -
  • DOI: doi: 10.1038/s41375-020-0737-9.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Increased granulopoiesis in the bone marrow following Epstein-Barr virus infection (2019)
  • Author(s): Katahira Y, Higuchi H, Matsushita H, Yahata T, Yamamoto Y, Koike R, Ando K, Sato K, Imadome KI, *Kotani A.
  • Journal Title: Sci. Rep. Volume: 9(1) Pages: 13445
  • DOI: doi: 10.1038/s41598-019-49937
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] EBV LMP1 in Gingival Epithelium Potentially Contributes to Human Chronic Periodontitis via Inducible IL8 Production. (2019)
  • Author(s): Watanabe N, Nodomi K, Koike R, Kato A, Takeichi O, Kotani AI, Kaneko T, Sakagami H, Takei M, Ogata Y, Sato S, Imai K.
  • Journal Title: In Vivo. Volume: 33(6) Pages: 1793-1800.
  • Peer Reviewed