2020 Fiscal Year Annual Research Report

がんにおける薬剤耐性の阻害を目指したZIC5標的薬の同定と検証

Research Project

Project/Area Number	17H05056
Research Institution	Tokyo University of Pharmacy and Life Science
Principal Investigator	佐藤礼子東京薬科大学, 生命科学部, 講師 (90469966)
Project Period (FY)	2017-04-01 – 2021-03-31
Keywords	メラノーマ / 薬剤耐性
Outline of Annual Research Achievements	がん細胞が治療薬に抵抗性を持つ現象である「薬剤耐性」はがん根治を妨げる大きな問題であり、薬剤耐性を克服する治療法の開発が必要である。研究代表者らはこれまでに、メラノーマの薬剤耐性を亢進させている因子としてZIC5を同定している。がん特異的に高発現しているZIC5はメラノーマ・大腸癌・前立腺癌の薬剤耐性を亢進させる。ZIC5を阻害すると、分子標的薬や抗がん剤によるがん細胞死の誘導率が大幅に増加する。また、ZIC5の阻害により、既に薬剤耐性を獲得しているメラノーマ細胞の細胞死も誘導できる。本研究の目的は、ZIC5の機能を阻害する低分子化合物を見つけ出し、ZIC5阻害薬が薬剤耐性の減弱に有効であることを示すことである。本研究課題において我々は、１５０００種類以上の化合物についてスクリーニングを行い、約50コのヒット化合物を得ている。これらのヒット化合物に対して二次スクリーニングを行い、ZIC5の局在、タンパク量や分子量を変化させる化合物を同定した。また、正常ヒトメラノサイトや正常ヒトケラチノサイトに対する影響や複数のメラノーマ細胞株に対して細胞死誘導効果を検証し、正常ヒト細胞に対する影響は少なく、メラノーマ細胞株に対して細胞死誘導効果をもつ複数の化合物を同定した。また、酵母two-hybrid 法により約１０コのZIC5結合候補タンパク質を同定しているが、同定された複数のタンパク質に対し、メラノーマ細胞内でのZIC5との結合を免疫沈降法で確認した。そのうちの一つのタンパク質を発現抑制するとZIC5により誘導される因子の発現が低下した。さらに、質量分析によりZIC5結合タンパク質を約100個同定し、複数のタンパク質がZIC5タンパク質の安定性に関与していることを明らかにした。
Research Progress Status	令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
Strategy for Future Research Activity	令和2年度が最終年度であるため、記入しない。