Fli1の発現異常を軸とした膠原病の病態におけるγδT細胞の機能解析

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17H06633
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 三枝 良輔 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (50800992)
• Project Period (FY): 2017-08-25 – 2019-03-31
• Keywords: 膠原病

Outline of Annual Research Achievements

これまでの遺伝学的な多くの検討により、転写因子Fli1の様々な細胞における発現変化が、膠原病の中でも特に全身性強皮症、全身性エリテマトーデスでその発症に関与している可能性が指摘されており、その機序の解明が待たれるところである。さらに近年それらの疾患の病態にγδT細胞が関与していることが報告されている。そのような背景から，まずFli1の発現が恒常的に低下しているγδT細胞の機能について検討するため、Fli1 floxマウスとTcrd -Creマウスを交配し、γδT細胞特異的Fli1ノックアウトマウスを作成、維持、繁殖させた。γδT細胞特異的Fli1ノックアウトマウスから，磁気細胞分離法を用いてγδT細胞を単離し，その細胞の性質を主にフローサイトメトリーを用いて検討した。その結果，コントロールマウス由来のγδT細胞に比べてIL-17Aの発現が上昇している可能性があることを見出した。γδT細胞は特にマウスにおいてIL-17の主要な分泌源として知られており、全身性強皮症、SLEではIL-17のその病態への関与が指摘されている。そのため、γδT細胞におけるIL-17分泌を刺激するようなIL-1βやTNF-αといったサイトカイン刺激をin vitroで行い、その刺激に対する反応をフローサイトメトリー、ELISA法および定量的リアルタイムPCR法を用いて評価を行い，γδT細胞特異的Fli1ノックアウトマウス由来のγδT細胞では，それらの刺激に対してより多くのIL-17Aを分泌する可能性を見出している。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

今年度，γδT細胞特異的Fli1ノックアウトマウスを作成、維持、繁殖させたが，繁殖状況がやや芳しくなく，動物モデルの作成がやや遅れているが，おおむね順調に進展している。

Strategy for Future Research Activity

γδT細胞特異的Fli1ノックアウトマウスを用いて，動物モデル(ブレオマイシン誘発強皮症モデルおよびTLR7アゴニストによるSLE誘発モデル)の作成を行い，その表現型を解析することを目標とする。