2018 Fiscal Year Annual Research Report
Search for the therapeutic target for the cell cycle and epigenome control in leukemia stem cells
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17H06895
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
竹立 恭子 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 研究員 (00806557)
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| Project Period (FY) |
2017-08-25 – 2019-03-31
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| Keywords | 白血病幹細胞 / Geminin / 未分化性維持 / 細胞周期 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ポリコーム複合体１とHoxは白血病幹細胞の活性維持にも必須である。従って、申請者の研究グループが見出したこれらの因子によるGemininの発現制御機構が白血病幹細胞の活性をも支持していることが予想されたため、まず急性白血病のモデルとしてMLL-AF9、Hoxa9+Meis1a、慢性白血病のモデルとしてBCR-ABLの各遺伝子をGeminin-EYFPノックインマウスの骨髄由来の未分化造血細胞に、レトロウイルスベクター又はレンチウイルスベクターにより導入し、致死的放射線照射を施したマウスに移植し白血病を発症させ、Geminin-EYFPの発現強度を調べた。次に、Geminin-EYFPノックインマウスを用いた骨髄細胞白血病発症モデルマウスから白血病幹細胞の分画を回収し、この細胞を次世代シークエンサーにかけて、Gemininの発現動態と相関して特異的な発現動態を示す遺伝子を同定した。そして、申請者が確立しているGemininに対するshRNA発現レトロウィルスを用いてGemininの発現、白血病幹細胞のGemininの発現を制御し、標的遺伝子の発現を解析することで、この遺伝子がGemininの制御下にあることを検証した。またMLL-AF9やHoxa9+Meis1aによる自己複製能や静止期維持など白血病幹細胞の活性を付与する分子イベントにおいてのGemininの直接的、あるいは間接的な標的遺伝子を同定した。併せて細胞生物学的手法では細胞周期制御因子について、免疫染色やDuolink法によって細胞周期の同定を行なった。一方で、白血病幹細胞特異的な CP-Geminin の過剰発現誘導法を開発し、その白血病再発予防効果を急性骨髄性白血病 (AML) 治療モデルマウスとヒト AML 細胞異種移植モデルにて検証を行った。
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| Research Progress Status |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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