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2019 Fiscal Year Annual Research Report

タイトジャンクションの形成機構の解明

Research Project

Project/Area Number 17J00211
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

重富 健太  九州大学, システム生命科学府, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2017-04-26 – 2020-03-31
Keywordsタイトジャンクション / 細胞膜脂質
Outline of Annual Research Achievements

本年度は、前年度までに明らかにしたタイトジャンクション領域に多く存在するコレステロールや炭素数20以上の極長鎖脂肪酸鎖を有するスフィンゴミエリンがタイトジャンクションの形成にどのように関与しているかを調べた。そこで、タイトジャンクションを消失した細胞における脂質の局在や脂質組成を調べることで、タイトジャンクション領域の脂質がClaudinを集積させ、タイトジャンクションの形成に至っているのか、または、脂質の集積がClaudinを集積させ、タイトジャンクションの形成を誘導しているのか、手がかりを得ようと考えた。タイトジャンクションは複数のClaudinアイソフォームが集積して形成されている。そのため、一つのClaudinアイソフォームを欠損しても、タイトジャンクションの構造は維持されたままである。そこで、すべてのClaudinアイソフォームを欠損した上皮細胞株を樹立することにした。CRISPR-Cas9法を用いた遺伝子編集によって、すべてのClaudinを欠損したClaudin null細胞の樹立に成功している。現在、Claudin null細胞での細胞膜脂質の局在や脂質組成の変化を解析中である。
また、前年度までに行っていたアドヘレンスジャンクションの必須構成タンパク質であるα-cateninを欠損したα-catenin KO細胞を利用したタイトジャンクション形成機構の解析に関しても、新たな知見を得ることができた。タイトジャンクションの形成には、アドヘレンスジャンクションの形成が先立って必要である。これまでに、アドヘレンスジャンクションの形成による細胞膜脂質の局在の変化がタイトジャンクションの形成を誘導することを報告してきたが、細胞骨格の配向性等の変化もタイトジャンクションの形成に必要であるという予備的なデータを得つつあるので、その点に関しても検討を進めていきたい。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (3 results)

All 2019

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results)

  • [Journal Article] Cell Adhesion Structures in Epithelial Cells Are Formed in Dynamic and Cooperative Ways2019

    • Author(s)
      Shigetomi Kenta、Ikenouchi Junichi
    • Journal Title

      BioEssays

      Volume: 41 Pages: 1800227~1800227

    • DOI

      10.1002/bies.201800227

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Roles of tight junction in fence function and epithelial polarization2019

    • Author(s)
      Shigetomi Kenta, Ikenouchi Junichi
    • Organizer
      Gordon reseach conference
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 重富健太、池ノ内順一2019

    • Author(s)
      タイトジャンクションの消失が隣接する細胞膜構造に与える影響の解析
    • Organizer
      第42回日本分子生物学会年会

URL: 

Published: 2021-01-27  

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