2018 Fiscal Year Research-status Report

間葉系幹細胞へのストレスによる骨関節疾患発症メカニズムの解明

Research Project

Project/Area Number	17K01452
Research Institution	Kyoto Tachibana University
Principal Investigator	木村智子京都橘大学, 健康科学部, 専任講師 (00449852)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	宇田川潤滋賀医科大学, 医学部, 教授 (10284027) 醍醐弥太郎滋賀医科大学, 医学部, 教授 (30345029) 桑形麻樹子昭和大学, 医学部, その他 (70398684)
Project Period (FY)	2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords	胎生期低栄養 / メタボリックシンドローム / 骨関節疾患 / 非アルコール性脂肪性肝疾患
Outline of Annual Research Achievements	前年度、妊娠5.5～11.5日のWistarラットの給餌量を対照群の40％に制限した低栄養群と対照群の産仔において、生後12週齢で卵巣摘出術（OVX）もしくは偽手術（sham）を行い、対照OVX群、対照sham群、低栄養OVX群、低栄養sham群の４群を作成している。また、これら４群が24週齢（術後12週齢）ならびに34週齢（術後24週齢）になった時点で材料採取を行った。これをもとに、骨・関節疾患関連ならびにメタボリックシンドローム関連の解析を進めていった。骨・関節疾患関連の解析として、骨ならびに関節軟骨の断片化が術後どのように変化しているかを確認した。術後２・４・６週に採取した血清中のCTX-Ⅰ量ならびに尿中のCTX-Ⅱ量に4群間で有意差が認められなかったことから、術直後より術後６週間の経過の中では、低栄養OVX群の骨吸収率ならびに軟骨ターンオーバー率は他群と比べ大きな差が認められないことが分かった。メタボリックシンドローム関連の解析としては、対照群と低栄養群の肝臓を採取し、肝細胞の培養実験を行った。対照群ならびに低栄養群から採取した肝臓から肝細胞を単離し、培養実験にてE２への反応性を確認したところ、両群間で有意差は認められなかったものの、低栄養群の肝細胞はE2を添加しなかった場合の脂肪蓄積量が高い傾向を示し、低栄養群の肝細胞は脂質代謝異常を来すことが示唆された。これらの成果は、学会発表（第７回日本ＤＯＨａＤ学会学術集会．2018.）で発表した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 本研究課題となっている骨・関節疾患に繋がる運動器系の加齢性変化を確認するとともに、メタボリックシンドローム関連の解析も同時に進めている。このため培養実験用の動物飼育などの影響で、実験時期をずらすなどの配慮が必要となった。しかしながら、今後は動物飼育など行うことなく、既に採取した材料にて解析が進められるため、現在の進捗状況の遅れを取り戻すべく、再度研究計画を立て直しながら、予算内で有益な成果を生み出す努力をしている。
Strategy for Future Research Activity	本研究課題で主眼が置かれている骨粗鬆症ならびに変形性関節症に加え、これら加齢性の運動器疾患とも深い関わりを持つ肥満ならびにメタボリックシンドロームについても同時に解析を進めていく。主に、培養実験を中心とした再現実験を進めていき、論文投稿の準備に入っていきたいと考えている。
Causes of Carryover	当初、平成30年度の契約では、全ての実験を終了させ、平成31年度は論文投稿準備に当てる予定であったが、実験手順の関係上、少々進捗状況に遅れが生じたため、最終確認としての培養実験等を今年度実施することとなった。従って、今年度は論文投稿準備のみならず、今年度実施する予定である研究備品や消耗品購入の必要性がある。故に、今回次年度請求額が生じることとなった。