2018 Fiscal Year Research-status Report
Establishment of rapid and simple test for detection of thyroid cancer
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17K01824
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| Research Institution | Daito Bunka University |
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Principal Investigator |
日野 るみ 大東文化大学, スポーツ健康科学部, 准教授 (60451770)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大城 聰 大東文化大学, スポーツ健康科学部, 教授 (30160485)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 甲状腺 / 乳頭癌 / 蛍光プローブ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
＜目的＞ 蛍光プローブ法は組織に噴霧するだけで、癌細胞のみに特異的かつ短時間で検出できる画期的な技術であり、東京大学大学院生体情報学教室の浦野教授の研究に基づく方法である。蛍光プローブの臨床学的研究は、乳癌、卵巣癌、前立腺、食道癌、脳腫瘍(膠芽腫)、肺癌など、複数の臓器で検討され精力的に進んでいるが、甲状腺では未だに検討されていない。今回、申請者も共同研究で甲状腺癌特異的に光る蛍光プローブの候補を見出した。そこで甲状腺手術検体を用いて乳頭癌に対する蛍光プローブ法の有効性を検討した。
＜対象と方法＞ 甲状腺手術検体を少量用い、蛍光プローブ液を添加し蛍光顕微鏡で蛍光性を確認した。蛍光プローブはProteoGREEN-gGlu (gGlu-HMRG) を用いた。γ-グルタミルトランスペプチダーゼ (GGT) 活性が高い癌で蛍光検出可能である。蛍光性を有する部位が癌であるかどうをHE染色で確認した。陰性コントロールは同一検体の非癌部を用いた。GGTの発現の確認は免疫染色を施行した。なお、申請者は協力機関病院に甲状腺外科的切除検体に対し倫理申請が承認されている。
＜結果＞ 甲状腺乳頭癌１６例すべて癌特異的にプローブによる蛍光性が確認された。一方、非癌部の検体ではプローブによる蛍光は確認されなかった。慢性甲状腺炎や腺腫様甲状腺腫では蛍光が見られなかった。蛍光性を有した癌部において免疫染色でGGTの発現を確認した。
＜考察＞ 甲状腺乳頭癌に関してはgGlu-HMRG蛍光プローブ法による癌検出の可能性が示された。今後は本蛍光プローブ法を多数の症例で検証し、有効性が確認されれば、術中の迅速、簡易な癌検出が可能である。また、病理医不在の医療機関でも簡便に乳頭癌が検出できる可能性も見出された。ここまでの研究成果は、英文論文に投稿し受理された（Thyroid research 2018）。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
臨床検体を用いたパイロットスタディーにおいて、成果を出し、英文論文にまとめる事が出来たから。
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| Strategy for Future Research Activity |
パイロット研究として、今の段階の蛍光プローブ研究は、甲状腺乳頭癌の16症例を含む23例に施行し、申請者の選定した蛍光プローブが甲状腺乳頭癌に応用可能な事を見出し結果発表した（Thyroid research、2018)。今後、臨床的応用に向けて研究を進める為には、できれば100例以上の症例で、蛍光プローブ法の有効性が再現できるかを目指したい。また、分子レベルでは、GGTの活性が実際に細胞の蛍光性に寄与しているかどかを確認する為に、阻害剤を用いる事も計画している。甲状腺乳頭癌への蛍光プローブ法の有効性がある程度示す事が出来た後は、多くの臨床の現場でその方法が簡便に使えるようになる為に、現在高価である蛍光イメージャーに代わる簡易蔵置の開発を試みたいと考えている。
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| Causes of Carryover |
実験で用いるイメージャーを貸与していただけた事や科研費交付前に予備研究で用いたプレパラートや染色試薬をしばらくの間使う事ができたので、事前の計画していた予算は次年度に繰り越す事ができた。本年度は免疫染色や阻害剤など試薬購入が必要な事、パイロット研究として結果をまとめたので、成果発表を国内外で行い、共同研究など次につなげていきたい。従って、それらに繰り越し分を用いたいと考えている。
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