2019 Fiscal Year Research-status Report
Studies of physiological role of microglia on hippocampus-dependent learning
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17K01980
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| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
明間 立雄 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 名誉教授 (60128585)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤岡 仁美 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (50410064)
舩橋 利也 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (70229102)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 海馬 / 高次機能 / 学習 / マイクログリア / Cre / AAV / DREADD / dTA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度までに、Creを発現した細胞に特異的にその細胞を消去させるdiphtheria toxin A subunit (dTA)、もしくはその細胞特異的に機能を調節するDesigner Receptors Exclusively Activated by Designer Drug (DREADD)法を用いて中枢神経系の機能を調節するさせるアデノウイスル (AAV, Addgene) の発現は確認した。マウスから変更し，今年度はラットを用いてミクログリア特異的にCreを発現させる系の確立を試みた。Creを発現すれば，dTAが発現し，また，DREADD法がもちいれるAAVであるからだ。本研究施設ではラットにAAVを投与することが出来なかったので、規約改正、実験準備に時間を要したが、現在は、解決している。また，Rat Resource & Research Center （RRRC）でLEラットにCX3CR1によって駆動されるCreを組み込んだknockin動物が存在するので，現在導入予定である。導入されれば、全ての実験の準備は整っているので速やかに実験がはじめられる。一方、ミクログリア特異的CD68のプロモーターでDREADDを発現するAAVも導入しているので海馬における発現を観察した。その結果、脳定位手術により海馬の歯状回に発現することが明らかとなった。今後、良いToolとなることが期待される。現在，このAAV-CD68-DREADDを用いて行動の変化，学習の変化を観察している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
Cre ratの作製がうまくいかなかった。また，本学の動物センターの規定と本研究がそぐわなかったため，規定を改訂するのに時間を要した。現在は解決済みである。一方，米国でコロナウイルスが蔓延してRRRCの業務に大幅な遅延がでているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
Cre ratはRRRCにデポジットされ、また、本学の規定が改訂されたため、本研究を遂行する障害がなくなり、全ての研究ツールは速やかに実行に移せる状態にある。
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| Causes of Carryover |
本年度は節約を心がけたので次年度に繰り越し分が出来た。しかし、消耗品のストックが減少した。その分，次年度は繰り越した分を利用して次年度の消耗品として使わざるを得ないので次年度の予算額が若干増える。
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Research Products
(1 results)
