2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of CRISPR/HDR genome editing technology in primary T cells for improved immunotherapy
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17K07212
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
大内 靖夫 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任助教 (70553858)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | ゲノム編集 / T細胞 / がん免疫療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、免疫チェックポイント阻害剤やがん抗原特異的TCRまたはキメラ抗原受容体(CAR)遺伝子導入T細胞を用いたがん免疫療法は第四の治療法として注目されている。しかし、これらの治療法は重篤な自己免疫疾患関連副作用(irAE)、がん免疫編集機構による免疫系の疲弊、非常に高額な治療費、ウイルスベクターを用いた遺伝子導入など非常に多くの問題を抱えている。そこで本研究課題ではT細胞に対してCRISPR/Cas9ゲノム編集技術を用いた非ウイルス遺伝子導入技術を開発し、1 STEPで抗原特的T細胞を作成し、各種がん、免疫疾患モデルマウスを用いて、その細胞の有効性を評価することで、免疫細胞療法の基盤技術を構築することを目的とした。令和元年度、研究計画に従い、新たに米国ソーク研究所の共同研究者が開発したHITI法も取り入れ、マウスT細胞における遺伝子Knockin効率の改善を図った。その結果、約3%の割合で目的の細胞を得ることに成功した。しかし、依然Knockin効率が低い状況であり、Knockinドナーの導入効率にも問題があることが示唆された。そこで海外共同研究者とともにマウス初代T細胞を標的とした遺伝子導入ナノ粒子の開発を進めた。その結果、マウスT細胞において簡便かつ高効率で遺伝子導入できるナノ粒子を開発した。また本ナノ粒子にゲノム編集ツールを導入することでT細胞に対して簡便にゲノム編集を実現できるゲノム編集ナノ粒子を開発した。本技術は従来の遺伝子導入試薬では不可能であった初代T細胞に対する簡便な遺伝子導入およびゲノム編集を可能にする技術であり、免疫細胞療法の汎用化において重要なツールになることが期待できる。
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