2018 Fiscal Year Research-status Report
メモリー指向性TCRを基盤とした新規がん免疫療法の開発
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17K07216
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
森本 創世子 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座助教 (10649023)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | WT1 / T細胞受容体 / TCR avidity / memory |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの研究より、我々は、T細胞表面に発現する各細胞固有のT細胞受容体（T cell receptor: TCR）が有する抗原ペプチド-MHC分子複合体への反応の強さ（TCR avidity）に反映されない「何か」によってT細胞の分化の方向性（つまり、エフェクターT細胞もしくはメモリーT細胞に分化する方向性）や機能に違いが生じる可能性を示唆する結果を得た。しかしながらこの結果は、遺伝子背景や共刺激分子の細胞表面発現が様々なprimary T細胞を用いて得た結果であるため、正確にTCR avidityを評価できていない可能性が考えられた。そこで、T細胞の分化を決定づける因子を探索するにあたり、まず初めに、TCR avidityを正確かつ簡便に評価できるplatform細胞の作製を試みた。内因性TCR発現を欠いているJurkat-76細胞株にヒトCD8分子およびNFAT-GFPレポーター遺伝子を導入することで、PMA/ionomycin刺激によってNFAT下流のGFPが陽性となる2D3細胞の作製に成功した。この2D3細胞に、異なるα鎖およびβ鎖からなるTCRを有する4種類のWT1特異的CD8+ T細胞クローン由来のTCRをそれぞれ遺伝子導入し、WT1ペプチドに対する反応性をEC50で評価したところ4種類のTCRのavidityが異なることを明らかにできた。さらに、これらTCRをヒトCD8+ T細胞に遺伝子導入し、cytokine産生能および増殖能、細胞傷害活性によってeffector機能を評価したところ、high avidity TCRを発現するT細胞のみがこれらeffector機能を示した。以上より、TCR functional avidityを正確かつ簡便に評価できるplatform細胞（2D3細胞）の作製に成功した。この成果を2018年度に学会および論文で発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
T細胞の分化の方向性を決定する因子を探索する上で、TCR avidityを正確かつ簡便に評価できるplatform細胞の作製に成功したことは重要であり、前進していると考える。しかしながら、TCRのavidityに依存しないメモリー指向性TCRを規定する遺伝子を探索するためには、分化様式が異なると考えられるCD8+ T細胞とCD4+ T細胞のいずれにおいても共通してT細胞のメモリーとしての性質（優れた増殖能や長期生存など）を規定する遺伝子を選択することが重要である。したがって、遺伝子探索に先立って、WT1特異的CD4+ T細胞由来TCRのTCR avidityを評価できるplatform細胞の作製を試みる。
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| Strategy for Future Research Activity |
2D3細胞にヒトCD4を遺伝子導入し、CD4-2D3細胞を作製する。このCD4-2D3細胞にすでに我々の研究室で樹立している2種類のWT1特異的CD4+ T細胞クローンより単離したTCRを遺伝子導入し、WT1ペプチドに対する反応性を評価する。また、これらTCRをprimary CD4+ T細胞に遺伝子導入しcytokine産生能などの機能評価を行う。CD4-2D3細胞で評価したTCR avidityとTCR導入CD4+ T細胞で評価した機能が一致する、CD4+ T細胞由来TCRのTCR functional avidityを正確かつ簡便に評価できるCD4-2D3細胞の樹立を試みる。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] Establishment of a novel platform cell line for efficient and precise evaluation of T cell receptor functional avidity2018
Author(s)
Soyoko Morimoto, Fumihiro Fujiki, Kenta Kondo, Hiroko Nakajima, Yoshiki Kobayashi, Miki Inatome, Nao Aoyama, Yuya Nishida, Akihiro Tsuboi, Yoshihiro Oka, Sumiyuki Nishida, Jun Nakata, Naoki Hosen, Yusuke Oji, and Haruo Sugiyama
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Journal Title
Oncotarget
Volume: 25
Pages: 34132, 34141
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] A versatile T cell-based assay to assess therapeutic antigen-specific PD-1-targeted approaches2018
Author(s)
Maarten Versteven, Johan M.J. Van den Bergh, Katrijn Broos, Fumihiro Fujiki, Diana Campillo-Davo, Hans De Reu, Soyoko Morimoto, Quentin Lecocq, Marleen Keyaerts, Zwi Berneman, Haruo Sugiyama, Viggo F.I. Van Tendeloo, Karine Breckpot, and Eva Lion
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Journal Title
Oncotarget
Volume: 9
Pages: 27797, 27808
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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