癌精巣抗原CRT2を用いた新たなCAR-T細胞療法の開発

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K07233
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 林 恵美子 (林恵美子) 日本医科大学, 大学院医学研究科, ポストドクター (10620130)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 内山 徹 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 成育遺伝研究部, 室長 (10436107) [Withdrawn] ; 佐野 誠 日本大学, 医学部, 准教授 (70339323)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 遺伝子 / 癌 / 免疫学

Outline of Annual Research Achievements

近年、癌免疫療法の一つとして、キメラ抗原受容体発現T細胞療法(CAR-T療法)が注目されている。本研究においては、申請者が同定した癌精巣抗原CRT2を認識するCAR-T細胞(CRT2-CAR-T細胞)を樹立し、担癌マウスに供給できるシステムを構築することを目的とする。
当該年度においては、本研究の基盤となる癌精巣抗原CRT2を認識するヒトCRT2 (hCRT2)-CARをT細胞に感染させるためPG13パッケージング細胞を用いたプロデューサー細胞を作成し、hCRT2-CAR-T細胞作製法を確立した。 さらに、癌細胞株に対する抗腫瘍効果を検討した。 具体的には、ターゲット細胞にヒト膵臓癌細胞株、コントロールの細胞にHEK293細胞株を使用し、LDH assayにより膵臓癌細胞株に対する抗腫瘍効果を検討したところ、細胞傷害性が認められた。 従ってCRT2は膵臓癌を標的としたCAR-T細胞療法における優れた標的分子である可能性が考えられる。一方、CRT2-CAR遺伝子はマウスのCRT2も認識することができることを見出しており、現在、マウスCRT2(mCRT2)-CARベクターを作製中である。 今後は引き続き、そのべクターを用いてmCRT2-CAR-T細胞を作製し、癌細胞に対する傷害性をin vitroで検討するとともに、担癌モデルに対するhCRT2またはmCRT2-CAR-T 細胞の抗腫瘍効果をin vivoで評価する予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

癌細胞に対するhCRT2-CAR-T細胞の抗腫瘍効果の検討方法に時間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

昨年度に引き続き、担癌モデルマウスに対するCRT2-CAR-T細胞の抗腫瘍効果および抗癌剤併用による抗腫瘍効果を検討する予定である。

Causes of Carryover

担癌モデルマウス実験に関わる資材を繰越したため。次年度は担癌モデルマウス実験の研究計画を改め、in vivoにおけるCRT2-CAR-T細胞の抗腫瘍効果を解析する予定である。