2019 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of tuberization by florigen activation complex
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17K07609
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
田岡 健一郎 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 特任助教 (00467698)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | フロリゲン / ジャガイモ / 塊茎形成 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ジャガイモにおいて、フロリゲン様タンパク質SP6Aが転写因子FDL１とフロリゲン複合体を形成して塊茎（イモ）形成を促進し、アンチフロリゲン様因子が抑制することを強く示唆するデータを得ている。本研究では、塊茎分化進行過程でのSP6AやFDL１の局在変化やそれらの相互作用変化を明らかにし、塊茎分化初期マーカー遺伝子の発現変化と合わせて、フロリゲン複合体が誘導する塊茎分化の初期過程を細胞増殖・分化の観点から理解することを目的としている。昨年度に、原種に近い品種であるandigena W553-4を形質転換の親株として用いた結果、カナマイシンによる選抜でSP6AやFDL１のレポーター形質転換株を複数得ることができた。しかし、ハイグロマイシンやバスタによる選抜は困難であり、それらを用いた２重形質転換体を得ることはできなかった。本年度は、得られた１重形質転換体の発現解析をおこなったところ、複数の形質転換ラインでレポーターであるGUSの染色が確認できた。しかし、その発現は弱く安定していなかったため、更なる選抜が必要と考えられた。塊茎形成過程の各段階を詳細に解析するための試験管内塊茎誘導をandigena W553-4を用いて再現する実験系の構築を行い、塊茎誘導できるスクロース濃度とキネチン濃度を決定した。フロリゲン複合体の形成を阻害する候補化合物を得ていたため、薬理学的な観点からのアプローチを検討した。その結果、阻害剤によって、培養細胞内でのSP6AとFDL１の相互作用を阻害できることがわかった。また、SP6A過剰発現体での塊茎形成促進効果も阻害できることがわかった。
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