2019 Fiscal Year Annual Research Report
characterization of glycoside hydrolase 134 family mannanase
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17K07734
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| Research Institution | Meijo University |
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Principal Investigator |
志水 元亨 名城大学, 農学部, 准教授 (20423535)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 育男 名古屋大学, 生命農学研究科, 助教 (70743102)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | β-マンナナーゼ / GH134 / Aspergillus nidulans / Aspergillus oryzae / Man134 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、我々は β-マンナンを唯一の炭素源にした際に糸状菌 Aspergillus nidulans が細胞外に分泌する既知の β-マンナナーゼとはアミノ酸配列レベルで全く相同性を有さない新規 β-マンナナーゼ (AnMan134A と命名) を世界で初めて発見し、CAZy データベースにて新しい Glycoside Hydrolase ファミリー 134 (GH134) を創設した。本研究では、A. nidulans と近縁の麹菌由来の GH134 に属する β-マンナナーゼ AoMan134A の詳細な立体構造を明らかにすることを目的とした。
AoMan134A の立体構造を明らかにしたところ、AoMan134A はリゾチーム型の構造を有し Glu67 と Asp80 が推定活性部位であることが分かった。それぞれのアミノ酸を Gln および Asn に置換した変異型酵素で活性が消失したことから、Glu67 と Asp80 が活性部位であることが分かった。また、AoMan134A 分子内の Cys102 と Cys139 がジスルフィド結合を形成していることが明らかになった。これは AoMan134A の熱安定性の高さに関係している可能性がある。今後これらの Cys 残基を他のアミノ酸に置換した変異型酵素を調製することで、AoMan134A の高い熱安定性との関連について調べていく。
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