2020 Fiscal Year Research-status Report
「共生糸状菌」の二次代謝産物：ゲノムからの発掘と生物間相互作用における役割の解明
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17K07742
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| Research Institution | Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
本山 高幸 国立研究開発法人理化学研究所, 環境資源科学研究センター, 専任研究員 (70291094)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 応用微生物 / 菌類 / ゲノム / 抗生物質 / 共生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、共生糸状菌の宿主を用いた二次代謝産物の役割の解析を行うとともに、共生糸状菌を用いた化合物発掘を継続し、発掘した化合物を用いて化合物の生物間相互作用における役割を解析した。イネいもち病菌を放線菌Streptomyces griseusが生産するタンパク質合成阻害剤シクロヘキシミドで処理することにより、二次代謝産物のdihydropyriculol（DHP）の生産が誘導されることを見出した。DHPの生理作用は今まで知られていなかったが、DHPはS. griseusに対して強力な生育阻害活性を示すことを見出し、微生物間相互作用に関与することが示唆された。Gloeophyllum trabeum（キノコ、植物病原菌）のグループC TAS1ホモログの大量発現株でテヌアゾン酸と類似で、テヌアゾン酸とは異なる化合物の大量生産が引き起こされることを見出していた。大量発現株を大量培養して化合物の精製を試みたが、生産量が低いために精製は困難だった。そこで、グループC TAS1ホモログのイネいもち病菌での異種発現を行ったところ、テヌアゾン酸の大量生産が認められた。宿主でのグループC TAS1ホモログの大量発現ではテヌアゾン酸の類縁化合物と推定される化合物の大量生産が認められていたため、他にも生合成に必要な酵素の遺伝子があることが示唆された。グループC TAS1ホモログ遺伝子の近傍に、修飾酵素遺伝子の候補が存在し、生合成遺伝子クラスターを形成していることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は、共生糸状菌から発掘した化合物の役割を明らかにするとともに、共生糸状菌を用いた化合物発掘を継続し、発掘した化合物を用いて化合物の生物間相互作用における役割を明らかにすることを目的とした。イネいもち病菌を用いて二次代謝産物のdihydropyriculol（DHP）が微生物間相互作用に関与することを示唆するデータを得た。また、グループC TAS1ホモログがグループA TAS1と同様にテヌアゾン酸を生合成することを見出した。更に、テヌアゾン酸が更に修飾されて、最終産物が生じることが示唆された。以上のように、おおむね順調に研究が進展していると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はグループC TAS1ホモログが生産する化合物の単離・構造解析と生理活性の解析および生合成メカニズムに関する解析を主に行い、関連した成果に関して学会及び論文での発表を行う。まず、Gloeophyllum trabeum（キノコ、植物病原菌）のグループC TAS1ホモログの遺伝子クラスターの遺伝子群の大量発現株を大量培養して、化合物を精製し、構造解析を行なう。次に、発掘した化合物を用いて宿主生物以外の生物に対する生育阻害活性を解析する。非宿主生物として、バクテリア、酵母、糸状菌、動物細胞等を用いる。
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| Causes of Carryover |
次年度使用額が349,861円生じた。新しいタイプの二次代謝酵素TAS1のホモログを用いた共生糸状菌からの化合物発掘において、グループC TAS1ホモログが生産する化合物に関して様々な解析を行う予定であったが、新型コロナウイルス感染症の拡大により、研究を研究計画通り遂行することが困難であった。そのため、化合物精製や構造決定および生理作用解析等に関する研究費が減少し未使用額が生じた。
次年度は、計画変更に伴いグループC TAS1ホモログが生産する化合物の単離・構造解析と生理活性の解析および生合成メカニズムに関する解析及びそれに関する学会及び論文での発表を行うこととし、未使用額はその経費に充てることとしたい。25万円で物品購入を行い、研究を遂行する。その他の10万円で英文校閲等を行う。
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