2020 Fiscal Year Research-status Report
新規ナノ材料を利用した細菌性魚病に有効で実用的な水産用浸漬ナノワクチンの開発
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17K07922
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| Research Institution | Tokoha University |
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Principal Investigator |
三留 規誉 常葉大学, 教育学部, 准教授 (90431981)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | ナノワクチン / 魚病 / 外膜タンパク質 / 抗原 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
水産用ワクチンは注射法により個体ごとに接種するものがほとんどであり、一度に数万匹を処理しなければならない養殖場において普及の妨げとなっている。本課題では、キトサンを原料とした新規ナノ材料である中空針状のナノチューブを、浸漬ワクチンのベクターとして利用し、簡易なワクチンデリバリー法を開発するための研究を行う。具体的には、（１）魚のワクチンとなる抗原性タンパク質の調製法の開発、（２）ワクチンベクターのナノチューブの調製法とワクチンの導入法の開発、（３）作製したナノワクチンの評価を行う。これらにより、新規ナノ材料を利用した細菌性魚病に有効で実用的な水産用浸漬ナノワクチンを開発する。
2020年度は、カンパチ、アジ、スズキなどに感染してビブリオ病を引き起こすViblio harveiのワクチン開発を実施した。
Viblio harveiを培養し、ホルマリン処理して菌を不活性化したものを注射法ワクチンとした。このワクチン液をシリンジでコイに摂取し、3週間後に採血した。コイの血清中にListonella anfuillarumに対する抗体があることを、この菌に対するコイ血清のウェスタンブロッティングで確認した。
次に浸漬法ナノワクチン開発のため、培養菌体から、外膜タンパク質を精製した。この外膜タンパク質をナノチューブと混合し、凍結乾燥法でナノチューブ内に外膜タンパク質を導入し、浸漬法ナノワクチンとした。コイの飼育水に浸漬法ナノワクチンを加えコイを10分間浸漬した。3週間後にコイから採血し、外膜タンパク質の抗体ができていることをViblio harveiの外膜タンパク質に対するウェスタンブロッティングにより確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究代表者が所属機関を移動したため、新たな環境で研究を実施する体制を整えるのに時間がかかった。新型コロナウイルス感染症拡大防止の対応のため、研究の実施が制限される期間があった。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の研究の方策として、、ナノワクチンの最適な接種条件の探索と有効性の評価を行うことと、他の魚病に対するワクチンの作製と有効性の評価を行う。最適なナノワクチンの接種条件の検討では、使用するナノワクチンの濃度、接種する時間、回数を検討する必要がある。
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| Causes of Carryover |
国際学会の発表を予定していたが、新型コロナウイルス拡大の影響で開催が翌年度に延期になったことと、国内学会は、オンライン発表をしたため、今年度は旅費の支出がなかった。次年度は延期になった国際学会での発表、オープンアクセスの雑誌への論文投稿などに次年度使用額を当てる。
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Research Products
(3 results)
