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2019 Fiscal Year Annual Research Report

Construction of high level production system for anti-tubercular agent and anti-cancer drug by Escherichia coli

Research Project

Project/Area Number 17K08334
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

熊谷 孝則  広島大学, 医系科学研究科(薬), 准教授 (70274058)

Project Period (FY) 2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords抗結核薬 / D-サイクロセリン / 抗癌剤 / ヒドロキシウレア / 異種生産 / ゲノム解析
Outline of Annual Research Achievements

最終年度である本年度においては, まず, 昨年度に作製したハイドロキシウレア(HU)生産用大腸菌(dcsA, dcsB, および, ホウレン草由来のフェレドキシンおよびフェレドキシン還元酵素をコードする遺伝子を導入した大腸菌)を用いて, HU生産実験を行った。しかしながら, 種々の生産条件を試したものの, HU生産は認められなかった。この原因として, ホウレン草由来のフェレドキシンおよびフェレドキシン還元酵素は, DcsAの電子伝達系として機能するものの, 活性が微弱なため, DcsAによる十分なアルギニン水酸化が起こらなかったためではないかと考えられた。大腸菌を宿主としたHU生産システムの構築が達成できなかったため, L-セリンおよびL-アルギニンを原料とした大腸菌によるD-サイクロセリン(D-CS)生産研究は実施できなかった。
D-CS生産放線菌であるStreptomyces lavendulae ATCC11924においては, DcsAの電子伝達系が必ず存在するはずである。そこで, ATCC11924株のゲノム解析を実施し, DcsAの電子伝達系をコードする遺伝子の探索を行った。ゲノム解析の結果, 3つのコンティグ(総計8.06 Mb)が得られ, 7,235個のコーディングシークエンス(CDS)が存在することが推定された。CDSの詳細な解析の結果, フェレドキシンの候補遺伝子を8個, および, フェレドキシン還元酵素の候補遺伝子を4個見出すことができた。
研究期間全体を通して, ATP再生系付与によるD-CS生産性の向上を達成することができ, また, ATCC11924株のゲノム解析により, フェレドキシン, および, フェレドキシン還元酵素の候補遺伝子を見出すことができた。

  • Research Products

    (7 results)

All 2020 2019

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (6 results)

  • [Journal Article] Comprehensive analysis of resistance-nodulation-cell division superfamily (RND) efflux pumps from Serratia marcescens, Db102019

    • Author(s)
      Toba, S., Minato, Y., Kondo, Y., Hoshikawa, K., Minagawa, S., Komaki, S., Kumagai, T., Matoba, Y., Morita, D., Ogawa, W., Gotoh, N., Tsuchiya, T., and Kuroda, T.
    • Journal Title

      Sci. Rep.

      Volume: 9 Pages: 4854

    • DOI

      10.1038/s41598-019-41237-7

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] D-サイクロセリン生産性放線菌のゲノム解読と二次代謝産物生合成遺伝子クラスターの解析2020

    • Author(s)
      矢尾井 健人, 黒田 照夫, 森田 大地, 熊谷 孝則
    • Organizer
      日本薬学会第140年会
  • [Presentation] 放線菌Streptomyces lavendulae ATCC 11924のゲノムマイニング2019

    • Author(s)
      矢尾井 健人, 黒田 照夫, 森田 大地, 熊谷 孝則
    • Organizer
      第58回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会 中国四国支部学術大会
  • [Presentation] Sliv37110はポリリン酸キナーゼである-機能解析とD-サイクロセリン生産系での利用-2019

    • Author(s)
      熊谷 孝則, 谷本 桃子, 黒田 照夫, 森田 大地, 杉山 政則
    • Organizer
      第58回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会 中国四国支部学術大会
  • [Presentation] NBRC14001株はポリエンマクロライド系抗生物質を生産する2019

    • Author(s)
      中村 和音, 西村 祥, 山本 美也子, 黒田 照夫, 森田 大地, 熊谷 孝則
    • Organizer
      2019年度日本放線菌学会大会
  • [Presentation] D-サイクロセリン生産性放線菌のゲノムマイニング2019

    • Author(s)
      矢尾井 健人, 黒田 照夫, 森田 大地, 熊谷 孝則
    • Organizer
      第71回日本生物工学会大会
  • [Presentation] ゲノムマイニングにより見出したNBRC14001株によるポリエンマクロライドの生産2019

    • Author(s)
      西村 祥, 中村 和音, 山本 美也子, 黒田 照夫, 森田 大地, 熊谷 孝則
    • Organizer
      第31回微生物シンポジウム

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Published: 2021-01-27  

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