2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of novel gene therapy for rheumatoid arthritis
| Project/Area Number |
17K08379
|
|---|
| Research Institution | Shujitsu University |
|---|
Principal Investigator |
中西 徹 就実大学, 薬学部, 教授 (30243463)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
新井 祐志 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50347449)
長塚 仁 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (70237535)
山崎 勤 就実大学, 薬学部, 助教 (80596148)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| Keywords | 関節リウマチ / CD81 / 遺伝子治療 / キメラ抗体 / 遺伝子クローニング |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
リウマチモデルラットを用いて、その関節内に抗CD81抗体遺伝子（H鎖とL鎖）を搭載した治療用ベクターを注入する遺伝子治療実験を進めた。既に、ラットへの投与にあたって抗体分子が有効に作用するように、これまで関節リウマチ治療における有効性が確認されている、マウス抗CD81モノクローナル抗体のC領域をラット遺伝子に置き換えたマウスーラットのキメラ抗体遺伝子を、H鎖及びL差について作製し、これらを同一のベクター上に搭載してCHO細胞で発現させて、キメラ抗体タンパク質が生産されることと、生産された抗体がCD81に対する結合能を有することを確認した。さらに、これらのキメラ抗体遺伝子を、遺伝子治療用ベクターに並べて搭載し、このベクターを細胞に導入して、同様にキメラ抗体タンパク質が生産されることと、生産された抗体がCD81に対する結合能を有することを確認した。そこで、実際にこの遺伝子治療用ベクターをリウマチモデルラットの関節内に投与して、リウマチ治療実験を行うこととし、最初に最適投与容量について確認した。次に、GFP遺伝子を遺伝子治療用ベクターに搭載したコントロールベクターを作製して、これを、リウマチモデルラットの関節内に投与して、滑膜周辺の遺伝子導入部位やその発現量、さらに発現持続期間等について検討を行った。それらの結果を基に、現在、抗CD81キメラ抗体遺伝子搭載遺伝子治療ベクターを、実際にリウマチモデルラットの関節内に投与して、関節リウマチ治療効果を判定中である。
|
