2017 Fiscal Year Research-status Report
Antitumor activity of the combination of arsenic compound and tetrandrine against human breast cancer
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17K08465
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| Research Institution | Tokyo University of Pharmacy and Life Science |
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Principal Investigator |
袁 博 東京薬科大学, 薬学部, 講師 (10328552)
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2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | ヒト乳がん / ヒ素化合物 / テトランドリン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度に外科的に切除された乳がん組織を、熱可逆性ハイドロゲル（TGP）を用いて三次元培養し、より生体内と近い条件で乳がん組織に対するヒ素化合物（亜ヒ酸ナトリウム、二硫化二ヒ素）とテトランドリン（Tetra）の単独および併用効果を以下のように検討した。
①細胞毒性の観点からの検討：WST法により、薬物の単独、および併用が、乳がん組織の生存に対する明らかな影響を与えられなかった。その原因はまだはっきりされていないものの、一つ目は入手された乳がん組織自身の活性が低かった可能性が考えられる一方、設定された薬物の濃度が低かった可能性が考えられた。
②細胞分誘導の観点からの検討：ICAM-1は、乳腺上皮細胞の分化マーカーとして知られている。all-trans-レチノイン酸（ATRA）の処理により、ヒト乳がん細胞であるMDA-MB-231の細胞表面におけるICAM-1の発現誘導がしっかり確認され、乳がん細胞の分化誘導ポジティブコントロールとして確立された。ヒ素化合物、Tetraの単独、および併用によりMDA-MB-231におけるICAM-1の誘導の有無を引き続き検討する。
③Cytometric Bead Array（CBAアッセイ）を用いて、上記三次元培養の培養上清中のIL-6, IL-10, IL-17A, TNF, IFN-γおよびTGF-βの測定系を確立した。薬物の処理により、各種サイトカインのある程度の量的変動をもたらした。
④ヒト乳がん由来組織の担がんモデルマウスを作製するために、まずMDA-MB-231担がんモデルマウスの腫瘍組織の一部をヌードマウスに接種し、培養がん細胞ではなく、腫瘍組織からの担がんモデルマウスの作製を試みた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ヒト乳がん組織をなかなか入手しにくい中で、ほぼ平成29年度の研究実施計画通りに実験を実施し、概ね順調に進んでいる。とりわけ、TGPゲルを用いた三次元培養系の確認、培養条件の検討をしっかり検討できた。また、CBAアッセイ系を用いた培養上清中の各種サイトカインの測定系の検討も完成した。今後、定期的に乳がん組織を入手できれば、検体数をもっと集め、統計学的にヒト乳がん組織に対するヒ素化合物、Tetra単独および併用効果を検討できる。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成29年度に確立した実験系を用いて、平成30年度の研究実施計画に則って研究を進めていく予定。
引き続きCBAアッセイを用い、培養上清中の各種サイトカインの量的変動を検討し、統計学的に各種サイトカインに対する薬物の影響を明らかにする。また、三次元培養された組織からタンパク質を抽出し、標的遺伝子タンパク質の変動を検討する予定。引き続き分化誘導の観点から、ヒト乳がん細胞におけるICAM-1の発現を検討することにより、乳がん細胞に対する薬物の影響を検討する。
健常者由来PBMNCs中のCD4+CD25+FoxP3+細胞（Treg細胞）割合に対する、薬物およびヒト乳がん組織の三次元培養後の培養上清の影響を検討する予定。
可能な限り、ヒト乳がん由来組織の担がんモデルマウスを作製し、腫瘍組織の増殖に対する薬物の影響を検討する。
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