2018 Fiscal Year Research-status Report
Establishing orexigenic vagal afferent subclass and its physiological and pharmacological roles for treating anorexia
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17K08546
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University |
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Principal Investigator |
岩崎 有作 京都府立大学, 生命環境科学研究科, 教授 (60528420)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 摂食亢進 / 求心性迷走神経 / TRPA1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの研究で、TRPA1アゴニストのdiallyl trisulfde (DATS)が求心性迷走神経を介して摂食量を亢進させる事を見出した。今年度、この作用の神経機序解明の一端として、求心性迷走神経からその投射先の延髄孤束核（NTS）へ伝達される神経伝達物質の解析を行った。
まず、DATSの経口投与によって、求心性迷走神経の一部ニューロンは活性化し、神経活性化マーカーのpERK1/2の発現が上昇したが、投射先のNTSでのpERK1/2の発現には変化がみられなかった。従って、求心性迷走神経からNTSヘの神経伝達は抑制性の作用であることが推察された。そこで、抑制性神経伝達物質のGABAが求心性迷走神経に発現するか検証をしている。GABAの合成酵素GAD67、GABAの輸送体Vgatを中心に、抗体免疫染色法、及び、in situ hybridazationを実施している。
DATSの摂食亢進作用が、ストレス性食欲不振に有効であるか、拘束ストレスによる食欲不振マウスを用いて検証した。暗期直前の2時間の拘束ストレスは、その後6時間の摂食量を有意に低下させた。一方、DATSの経口投与は、拘束ストレス性食欲不振を改善し、ストレスを与えていない群と同レベルまで回復させた。従って、DATSの求心性迷走神経を介した摂食亢進作用は、ストレス性の食欲不振に対して有効であることが、マウスを用いた実験で示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Nodose ganglionにおけるGABA作動性ニューロンの存在の有無を検証を開始した。抗体染色法では、良い抗体の探索や染色条件の検討に時間を要した。in situ hybridization法での解析も並行して進めている。
また、目的としていた食欲不振モデルマウスに対するDATSの効果を検証することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
・TRPA1アゴニストの摂食亢進作用におけるTRPA1発現求心性迷走神経の関与を、１）capsaicin塗布による迷走神経特異的denervation法、２）TRPA1サポニン毒を用いたdenervation、３）TRPA1 shRNAを用いたnodose ganglion特異的TRPA1ノックダウンなどを用いて検証する。
・食欲不振モデル動物として、抗がん剤シスプラチン、老齢マウスを用いて検証する。
・TRPA1アゴニストに応答するnodose ganglionサブクラスに発現する抑制性神経伝達物質を同定する。
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| Causes of Carryover |
予定し実施が遅れている実験（食欲不振モデルマウス、迷走神経障害モデルマウスにおけるDATS作用の検証）について、次年度に計画し、そのための物品費として使用する。
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