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2017 Fiscal Year Research-status Report

獲得免疫成立における活性酸素種産生酵素NOX1の新しい役割の解明

Research Project

Project/Area Number 17K08601
Research InstitutionKyoto Prefectural University of Medicine

Principal Investigator

松本 みさき  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (80533926)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 岩田 和実  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (60305571)
Project Period (FY) 2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords活性酸素種 / 免疫 / 抗体産生
Outline of Annual Research Achievements

活性酸素産生酵素NOX1/NADPHオキシダーゼは大腸上皮細胞に高発現するが、脾臓組織においても恒常的な発現が認められる。本研究では、未だ明らかでないNOX1の脾臓における役割を明らかにすることを目的とし解析を進めた。正常マウス脾臓よりB細胞とT細胞を分取しリアルタイムPCR法にて遺伝子発現を解析したところ、いずれの細胞分画でもNOX1は発現していた。特にB細胞ではT細胞に比して約2倍量のNOX1遺伝子発現が認められた。NOX2も同等の発現様式を示した一方、NOX4の発現は極めて低かった。次に、NOX1が抗体産生に及ぼす役割についてNox1遺伝子ノックアウトマウスを用いて解析した。DNP-KLH/alumおよびDNP-Ficoll抗原をマウスに単回腹腔内免疫し、2週後の血清IgM, IgG1, IgG3を定量評価した。現段階では例数は少ないが、野生型およびノックアウトマウスで同等の抗体産生が認められる傾向にある。今後の追加実験が必要である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ノックアウトマウスが多く得られず、特に抗体産生の実験については抗原量やアジュバントの変更を課題として残しており、初年度で充分な解析を終えることができなかった。

Strategy for Future Research Activity

1.抗体産生について追加実験を行う。初年度の解析では充分な抗体価上昇が認められなかったDNP-LPS抗原については抗原を増量して評価する。
2.B細胞およびT細胞におけるNOX1遺伝子発現および活性酸素産生について、TLRアゴニストや各種細胞刺激の影響を調べる。
3.喘息モデルマウスを確立し、抗体産生および肺組織中サイトカインや免疫細胞の浸潤を指標にNox1遺伝子欠損の影響を調べる。

Causes of Carryover

ノックアウトマウスが多く得られず、特に抗体産生の実験については抗原量やアジュバントの変更を課題として残しており、初年度で充分な解析を進めることができなかった。2年目に持ち越して実験を行う。

  • Research Products

    (1 results)

All 2018

All Journal Article (1 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results)

  • [Journal Article] The NOX1 isoform of NADPH oxidase is involved in dysfunction of liver sinusoids in nonalcoholic fatty liver disease.2018

    • Author(s)
      Matsumoto M, Zhang J, Zhang X, Liu J, Jiang JX, Yamaguchi K, Taruno A, Katsuyama M, Iwata K, Ibi M, Cui W, Matsuno K, Marunaka Y, Itoh Y, Torok NJ, Yabe-Nishimura C.
    • Journal Title

      Free Radic Biol Med.

      Volume: 115 Pages: 412-420

    • DOI

      10.1016/j.freeradbiomed.2017.12.019.

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2018-12-17  

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