2018 Fiscal Year Research-status Report
選択的mRNA核外輸送による雄性生殖細胞分化制御機構
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17K08630
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| Research Institution | Osaka Prefecture University |
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Principal Investigator |
片平 じゅん 大阪府立大学, 生命環境科学研究科, 准教授 (30263312)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 核―細胞質間輸送 / 遺伝子発現制御 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
真核生物では、RNA、タンパク質などの機能分子の核－細胞質間輸送が、細胞分化、生物個体の形態形成や発生など、さまざまな生命機能を支える遺伝子発現のために必須である。これまでに、mRNAの核から細胞質への輸送過程は、核で転写されたmRNAを遅滞なく細胞質の翻訳装置へ供給し、コードするタンパク質を効率よく発現させるため、非選択的かつ恒常的であるはずと、先入観を持ってとらえられてきた。しかし、申請者らを含む国内外の複数のグループの研究成果から、mRNAの核外輸送はきわめて選択的であること、mRNA選択輸送とその制御が種々の細胞機能発現に影響しうること、などが明らかになりつつある。本研究では、生体内における特定の細胞種において、複数の輸送受容体により核外輸送されるmRNAを新しいRNA標識法を用いて探索・同定し、mRNAの選択的な核外輸送による雄性生殖細胞の分化制御機構を解明することを目的として行なう。
研究計画に従い、平成30年度は融合タンパク質をコードするトランスジーンを保有するキメラマウスと野生型マウスの交配により得られたF1世代マウスをさらに野生型マウスと戻し交配し、融合遺伝子を保有するマウス系統の樹立を行なった。得られたマウス系統の精巣組織における融合遺伝子の発現解析は、今後、輸送受容体タンパク質に対する特異抗体を用いたウエスタンブロット法、免疫組織化学法などの手法で解析を行なっていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
平成30年度に所属が変更になり、研究環境が変化したことが一つの要因となり、進捗が予定よりも遅れている。計画した研究に関連する成果を国内学会、および、海外学術誌で発表することはできたが、計画自体が予定通りに進捗していないので、現在までの進捗状況を”遅れている“と判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでに精巣組織特異的に発現する輸送受容体の融合タンパク質、および、コントロールタンパク質をコードするトランスジーンを保有するマウスを作出することができた。一方、ユビキタスに発現する輸送受容体に関しては、得られた複数のトランスジェニックES細胞クローンを用いて他と同様の方法でマウス作成を試みたものの、マウス系統の作出に至っていない。同遺伝子は、必須遺伝子であることが知られており、片側アレルのみの遺伝子改変でも、キメラマウス作成に悪影響があることが予想された。今後、融合遺伝子の導入部位の変更などの方策講じ、マウス作成を試みる必要がある。
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| Causes of Carryover |
平成30年度、所属移籍にともなう研究進捗の遅れが影響し、研究予算執行に予定していたよりも遅れが生じた。平成31年度は研究進捗の遅れを取り戻すことに努め、平成30年度の未執行額は、無駄なく計画的に年度内に使用する予定である。
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[Journal Article] Relationship between PIWIL4-mediated H3K4me2 demethylation and piRNA-dependent DNA methylation.2018
Author(s)
Nagamori, I., Kobayashi, H., Nishimura, T., Yamagishi, R., Katahira, J., Kuramochi-Miyagawa, S., Kono, T., Nakano, T.
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Journal Title
Cell Reports
Volume: 25
Pages: 350-356
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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