2020 Fiscal Year Final Research Report
In vivo imaging of a secreted glycoprotein, Wnt5a
| Project/Area Number |
17K08633
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
General medical chemistry
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | Wnt5a / ライブイメージング / 線維芽細胞 / シングルセル解析 |
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| Outline of Final Research Achievements |
To elucidate the kinetics of Wnt5a protein in vivo, we generated Venus-Wnt5a knock-in mouse (Venus-Wnt5a KI) using CRISPR/Cas system. We confirmed that Venus-Wnt5a was expressed in lung, heart, stomach and kidney same as the endogenous Wnt5a protein. Because the homozygote of Venus-Wnt5a KI was embryonic lethal, we revealed that Venus-Wnt5a did not work in vivo.
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| Free Research Field |
細胞生物学
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
本研究ではCRISPR/Cas システムを用いることにより従来のES細胞を用いる方法と比べて大幅に短期間でVenus-Wnt5a KIを作製することが出来た。Venus-Wnt5aはin vitroではWnt5aとしてシグナルを伝えられたが、生体内において機能しなかった。実際にノックインマウスを作製することにより初めてVenusのような分子量の大きい蛍光タンパク質はWntタンパク質のタグとしては不適切であることが明らかとなった。この事実は今後の
分泌タンパク質の動態研究を行う上で非常に重要な知見である。
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