2017 Fiscal Year Research-status Report
新規HPVワクチン関連神経免疫異常症候群モデルマウスを用いた病態発症機構の解析
| Project/Area Number |
17K08671
|
|---|
| Research Institution | Tokyo Medical University |
|---|
Principal Investigator |
荒谷 聡子 東京医科大学, 医学部, 講師 (40387064)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| Keywords | HPVワクチン / モデルマウス / HANS / 視床下部 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
ヒトパピローマウィルス (HPV) 感染を病因とする子宮頸がんに対して開発された HPV ワクチンは感染予防に効果を示す一方で、多くの有害な副反応が世界中で報告され問題となっており病因・病態の解明が急務とされている。その症状は疼痛、運動障害、高次機能障害、内分泌異常など多岐にわたり、我々は HPV ワクチン関連神経免疫異常症候群 (HANS) と名付けた。HANS の病因・病態を明らかにするため HPV ワクチンを用いて HANS モデルマウスを作製し、運動機能および脳の組織学的異常を示すマウスが得ている。本研究では HANS 発症メカニズムの解明および安全性の高いワクチンの開発を目指して、HANS モデルマウスを用いたワクチン作用機序の解析および宿主反応メカニズムの解析を行う。
まず宿主反応メカニズムを明らかにするために野生型メスマウスに HPV ワクチンおよび百日咳毒素処理を行いHANS モデルマウスを作製し、運動機能の低下がみられる個体を確認した。マウスより血液、脾臓などの免疫細胞および脳の組織を採取し、サイトカインなどの発現を測定し宿主の応答メカニズムを解析した。脳の組織切片を採取し自己免疫に深く関与するサイトカイン IL-17 の発現を免疫染色にて発現を調べたところ ワクチン+百日咳毒素投与群ではコントロール群と比較して IL-17 を発現する細胞の増加が示唆された。ワクチン投与患者の髄液で IL-17 の増加が示唆されており本モデルマウスとの共通性が示唆された。現在、脾臓より免疫細胞を単離し検討を行っている。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
上述したように、HANS モデルマウスの免疫細胞分画および解析を行い、個体数を増やして検討する必要があるが HANS 患者にみられる病態と共通する結果を得ることができた。これをもとに宿主因子の応答の解明につなげる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
HANS 発症においてワクチンを接種した体内において何らかの過剰な免疫応答が起きていると考えられるため、どの免疫経路が病態に関与しているか、マウスに移植し病態を再現できるかどうか検討する。ワクチンおよび百日咳毒素を投与し現在の HANS モデルマウスを作製し、平成29年度検討したように血液および胸腺から密度分離法、表面マーカービーズを用いて 1) 血漿、2) B 細胞、3) T 細胞、4) その他の白血球細胞成分に分離する。各成分を放射線照射による免疫不全マウスに移植しおよび Ptx 処理を行い、病態 (運動機能、行動、組織、シグナル伝達、アポトーシス) について検討する。病態が検出できた群はさらに詳細に分離し検討する。ワクチン中の HANS 発症成分の同定に関しては、各成分 (HPV ワクチン、L1 タンパク質もしくは Al 塩) を免疫、Ptx を腹腔投与したマウスの行動学的解析、組織学的解析をさらに進める。
|
| Causes of Carryover |
試薬購入にあたり金額が不足したため、翌年度予算と合算して支払い予定である。
|
