2018 Fiscal Year Research-status Report

一般住民において、レジスチン遺伝子多型が耐糖能異常に及ぼす影響とメカニズムの解明

Research Project

Project/Area Number	17K08985
Research Institution	Ehime University
Principal Investigator	高田康徳愛媛大学, 医学系研究科, 准教授 (20432792)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	川村良一愛媛大学, 医学系研究科, 講師 (90533092) 大沼裕東京女子医科大学, 医学部, 准教授 (00294794) 大澤春彦愛媛大学, 医学系研究科, 教授 (90294800)
Project Period (FY)	2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords	レジスチン / 糖尿病新規発症 / インスリン抵抗性 / SNP / メチル化
Outline of Annual Research Achievements	１）コホート研究の5 年後の前向き調査の第二期として平成30年度に120名の一般住民の検診を行った。非糖尿病者全員に75gOGTT負荷試験を行い、0、1、2時間の血糖および、インスリンを測定し、5年間での糖尿病あるいは境界型への進展を調べた。更に、Matsuda index、HOMA2-IR, HOMA2-%S, HOMA-2B などのインスリン抵抗性・感受性指標の算出を行った。また、保存採血（DNA, RNA, 血清、血漿）を行った。２）更にELISAを用いて血中レジスチンの値を測定した。３）体組成計（TANITA MC-780A）による、体脂肪、筋肉量への影響、頸動脈エコーにより動脈硬化を調査した。４）600サンプルについてレジスチンのSNPとそれに関係するエピジェネティクスの関係を調べるため、パイロシーケンスを用いてメチル化の評価を行った。更にメチル化に影響する因子について解析を行った。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 当初の計画のように、前向きのＦ／Ｕのための検診、サンプル収集ができている。更に、レジスチンのSNPとそれに関係するエピジェネティクスの関係を調べるため、パイロシーケンスを用いてメチル化の評価をなしえた。
Strategy for Future Research Activity	対象者全員から、血清、DNA、whole blood cell および書面による同意を得ている。血清からmicro RNA を、whole blood cell からtotal RNA を抽出し、血中レジスチン値及び、レジスチンSNP-420 のG/G 型が、インスリン抵抗性や肥満、炎症に関連する遺伝子群に及ぼす影響を、NGS を用いたmicroRNA-seq や mRNA-seq、定量的RT-PCR、パイロシーケンスを用いたメチル化の評価、バイオインフォマティクスを用いた遺伝子ネットワーク解析などの手法を用いて明らかにする。
Causes of Carryover	平成30年度は健診の施行によるサンプル収集が主であり、物品費用が少額であった。尚、平成31年度からはDNA、RNAの抽出、qRTPCRなどの遺伝子解析が始まるため物品費は相当高額となる。