2019 Fiscal Year Annual Research Report
Mechanisms of fibrin polymerization based on analysis for dysfunctional fibrinogen variants
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17K09009
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
奥村 伸生 信州大学, 学術研究院保健学系, 教授 (60252110)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平 千明 信州大学, 学術研究院保健学系, 助教 (40779310)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | フィブリノゲン / フィブリン重合反応 / aホール / Ca結合部位 / D:D結合能部位 / A:a結合 / B:b結合 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【背景】フィブリノゲン（Fbg）はトロンビンによるフィブリノペプチド放出により，knob‘A’とhole‘a’のA:a結合，knob‘B’とhole‘b’のB:b結合，D:D結合でにより重合し，フィブリンを形成する．Fbgγ鎖D領域のこれらの部位が重合反応に関与する．我々はCa結合部位に変異を持つγΔN319D320Fbgの機能異常のメカニズムを明らかにする研究を行った．
【方法】γΔN319D320の機能異常の原因をhole‘a’機能が障害され重合反応が大幅に遅延するγD364HFbgと比較した．フィブリノペプチド放出能，フィブリン重合反応，走査型電子顕微鏡によるフィブリン線維の観察を実施した．さらに，プロトフィブリル形成能，hole‘a’機能，Ca結合能，D:D結合能を解析した．また，構造変化を予測した．
【結果】γΔN319D320は高濃度トロンビンと24時間反応させても重合反応が完全に欠如した．一方，γD364Hは高濃度トロンビン添加後2時間で緩徐な重合反応が認められた．さらに，γΔN319D320はhole‘a’機能，D:D結合能，Ca結合能のいずれも顕著に低下しており，プロトフィブリル形成が阻害されていることが明らかになった．
【考察】A:a結合が障害されているγD364Hは，B:b結合により緩徐に重合すると報告されていることから，重合反応が欠如するγΔN319D320は，A:a結合とB:b結合の両方が障害されていると推測した．γΔN319D320はhole‘a’，D:D結合部位，Ca結合部位の構造が変化するのみならず，γ鎖D領域全体の変化を惹起すると推察される．この構造変化が，隣接するBβ鎖D領域に存在するhole‘b’開口部の位置や方向に影響を及ぼし，hole‘b’とknob‘B’の距離や方向が変化することで，B:b結合が障害されると推察した．
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