2019 Fiscal Year Research-status Report
選択的蛍光可視化マウスを用いた腸炎疾患における筋層の障害と再生の分子基盤の解析
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17K09375
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
堀口 里美 福井大学, 学術研究院医学系部門, 学術研究員 (00595283)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀口 和秀 福井大学, 学術研究院医学系部門, 准教授 (20377451)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 炎症性腸疾患 / 消化管運動 / カハール介在細胞 / c-kit / PDGF受容体α / 線維芽細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、腸炎疾患の回復期における消化管運動調節性細胞（カハール介在細胞；ICC）の再生に関わる増殖・転写因子の作用機序の解明である。
TNBS炎症期と回復期筋層における分子動態を検討する必要があり、前年度の研究によりTNBs投与後の適切な細胞採取時期について決定することができた。これらの研究結果から、腸炎疾患の急性期及び回復期をそれぞれTNBs投与2日目、TNBs投与5日目と定義した。
今年度は、TNBS投与マウスの2日目および5日目における筋層の網羅的遺伝子解析を実施した。具体的には筋層よりRNAを抽出した後、cDNAを合成後、サブトラクティブ・ハイブリダイゼイション法により、差次的遺伝子ライブラリーを作製し、マイクロアレイ解析を行った。
その結果、回復期の遺伝子発現の変化に注目し、細胞増殖に関わる因子としては、Exo1, Hoxa11, tryptophan hydroxylaze 1, ankyrin repeat domain 1, kinase insert domain protein receptor , phospholipase A2 などがあった。また、成長因子としては、insulin-like growth factorなどに高い発現の上昇が認められた。また、TNFreceptor、inositol 1,4,5, triphosphate receptor3などでも回復期において、高い陽性率が認められた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
TNBS炎症期と回復期筋層における分子動態を検討TNBs投与後の適切な細胞採取時期について決定、また、腸炎疾患の急性期及び回復期をそれぞれTNBs投与2日目、TNBs投与5日目と定義し、網羅的解析を行うことができた。
本年度のマイクロアレイ解析の研究から、炎症性腸疾患急性期及び回復期における細胞増殖に関係する遺伝子群を挙げることができた。研究の進行は順調である。
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| Strategy for Future Research Activity |
前年度の研究結果により、候補として挙げられたTNBS投与後2日目と5日目の差次的遺伝子に関して、リアルタイPCRを行う。また、細胞組織学的同定を行う。
また、本年度のマイクロアレイ解析の結果から、TNBS投与後の3日目と4日目のサンプルにおいても、変動の見られる分子群が多数出てきた。これらの分子群の分子動態の精査のため、TNBS投与後、2, 3, 4, 5, 6, 7日後のマイクロアレイ解析を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
前年度までの研究により、今後サンプル数を増やしマイクロアレイ解析を行う必要があり未使用額が生じた。繰り越し分は、次年度に解析費用・試薬・消耗品に使用を予定している。
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