2018 Fiscal Year Research-status Report
A new development of antivirals for eradication of HBV cccDNA
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17K09400
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
森川 賢一 北海道大学, 医学研究院, 助教 (60384377)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂本 直哉 北海道大学, 医学研究院, 教授 (10334418)
須田 剛生 北海道大学, 大学病院, 特任助教 (20447460)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | B型肝炎ウイルス / cccDNA / HBx / DDB1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
HBV cccDNAの代謝機序の検討:これまでの検討や既知の分子として、Smc5/6、IFN-αを介したAPOBEC3AおよびLymphotoxin-βレセプター(LTBR)を介したAPOBEC3BがcccDNAの分解に関与しているとの報告があるが、その詳細な機序に関しては依然として不明のままである。その中で、Smc5/6に関してはHBx-DDB1（既にクローニング済）との共働によって分解され、その結果cccDNAからの転写が増強し、結果的にHBV複製が増強することが分かってきている。HBxはDDB1と結合することにより、E3ユビキチンライゲース機構をハイジャックし、cccDNAに抑制的に働く宿主制限因子を除去していると考えられる。我々は、各遺伝子型（Ae、Bj、C、D）のHBxをクローン化してタグ化し、DDB1と共遺伝子導入実験を行ったところ、HBVの遺伝子型にかかわらずHBxはDDB1と結合し、Smc5/6を分解していることが判明した。DDB1の領域を分割したクローンを作成し、HBxとの結合を免疫沈降法を用いて検討した。結果、DDB1内での既知のHBxと結合する領域ではなく、これまで既報にない領域内に強い結合を示すことが判明した。現在、DDB1内新規結合領域の同定と、その領域を標的としたペプチド合成を施行中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在は、HBV cccDNA代謝や転写抑制に働く宿主因子に標的を定め、その増強作用や発現上昇を促す新規化合物探索へと注力している。
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| Strategy for Future Research Activity |
こまでの検討で得られたHBV cccDNAの合成促進や合成阻害に関与する宿主因子、転写活性化促進や抑制に関与する宿主因子、代謝に促進的または阻害的に関与する宿主因子を随時クローニングし分泌型ルシフェラーゼであるガウシアルシフェラーゼをレポーターとしたハイスループットで評価可能な培養細胞システムを構築する。同システムを用いてランダム化学合成化合物ライブラリーや北大低分子化合物ライブラリーを用いて、宿主因子を増強する新規化合物の探索を行う。また同定した化合物は、HBVウイルス培養系を用いて、HBV cccDNAへの効果を検討する。さらにHBV陽性患者の肝組織を用いて、各宿主因子を免疫組織化学法、ウエスタンブロット法、RT-PCR法にて解析し、臨床病理学的特徴を解析する。
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[Presentation] Risk assessment of hepatocellular carcinoma in chronic liver disease patients with a combination of liver stiffness measurement and controlled attenuation parameter by FibroScan.2018
Author(s)
Morikawa K, Izumi T, Sho T, Suzuki K, Nakamura A, Ohara M, Kawagishi N, Umemura M, Nakai M, Suda G, Ogawa K, Kudo Y, Nishida M, Baba M, Furuya K, Sakamoto N.
Organizer
The European Association for the Study of the Liver (EASL) International Liver Congress.
Int'l Joint Research
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[Presentation] Clinical phase 1b study results for safety, pharmacokinetics and efficacy of ND-L02-s0201, a novel targeted lipid nanoparticle delivering HSP47 SIRNA for the treatment of Japanese patients with advanced liver fibrosis.2018
Author(s)
Sakamoto N, Ogawa K, Morikawa K, Suda G, Sho T, Nakai M, Suzuki H, Yamagata N, Tanaka Y, Ying W, Tamura Y, Niitsu Y, Maruyama K.
Organizer
he European Association for the Study of the Liver (EASL) International Liver Congress.
Int'l Joint Research
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