2018 Fiscal Year Research-status Report
肝線維化の新規診断・治療法の確立を目指したlet-7の発現・機能解析
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17K09435
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
松浦 健太郎 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (30580576)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | let-7 / 肝線維化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者が米国のC型慢性肝炎コホートの保存検体を用いて行った本研究を立案するきっかけとなった先行研究の結果について、本邦の複数のC型慢性肝炎コホートから肝生検時の保存血清検体および臨床情報を収集し、末梢血let-7 レベルと肝線維化進展度との相関の再現性を検証した。その結果、血清および血清由来の細胞外小胞中のlet-7aの発現は肝線維化の進展に伴い減少することを再現した。さらに、血清中のlet-7発現レベルは他の線維化マーカーと良好な相関をみとめた。これらの臨床検体を用いた検討の結果について、2018年の国内学会および英文誌に論文発表した。また、治療によりC型肝炎ウイルスの排除された患者の保存血清を用いて、その後の肝線維化・予備能の改善・悪化に関連するlet-7を含むmiRNAの発現解析を立案し、適切な検体を収集した。今後、網羅的解析を行う予定である。
一方、肝線維化に深く関わる肝星細胞内におけるlet-7の働きについて、ヒト肝星細胞株（LX-2)を用いて検討した。LX-2をいくつかのサイトカインで刺激したのちの細胞内のlet-7の発現レベルを検討したところ、有意な変化を確認した。また、let-7をLX-2に導入後の肝線維化関連の遺伝子発現を解析し、線維化関連分子の有意な変化を確認した。
肝線維化モデル動物（コリン欠乏食投与ラット、四塩化炭素肝障害モデルマウスなど）に対して、let-7 mimicをアテロコラーゲン、脂質ナノ粒子などを担体として投与し、肝線維化抑制効果について検討する実験計画を立て、当施設の倫理委員会で受理された。現在、適切なmiRNAの投与条件について、検討中である。let-7 mimicを投与したこれらモデルの肝組織の遺伝子発現をRNAseq、マイクロアレイなどを用いて網羅的に検討し、肝線維化から発癌に至る分子機構の解明を目指す。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
患者検体を用いた検討は、論文発表が終了し順調である。
動物モデルを用いた検討については、miRNAを効率的に肝臓へ運ぶための至適条件の検討のため、やや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
動物モデルを用いたlet-7の肝線維化抑制効果について検討をすすめ、細胞株を用いて得られた結果との整合性を検証する。
C型肝炎ウイルス排除後の肝線維化・予備能改善・悪化におけるlet-7を含むmiRNAの関連について検討する。
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| Causes of Carryover |
動物モデルを用いた実験の至適条件の検討のため、研究の遂行がやや遅れているため。
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[Journal Article] TLL1 variant associated with development of hepatocellular carcinoma after eradication of hepatitis C virus by interferon-free therapy.2019
Author(s)
Iio E, Matsuura K (co-first author), Shimada N, Atsukawa M, Itokawa N, Abe H, Kato K, Takaguchi K, Senoh T, Eguchi Y, Nomura H, Yoshizawa K, Kang JH, Matsui T, Hirashima N, Kusakabe A, Miyaki T, Fujiwara K, Matsunami K, Tsutsumi S, Iwakiri K, Tanaka Y.
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Journal Title
J Gastroenterol.
Volume: 54
Pages: 339-346
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Circulating let-7 levels in serum correlate with the severity of hepatic fibrosis in chronic hepatitis C.2018
Author(s)
Matsuura K, Aizawa N, Enomoto H, Nishiguchi S, Toyoda H, Kumada T, Iio E, Ito K, Ogawa S, Isogawa M, Alter HJ, Tanaka Y.
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Journal Title
Open Forum Infct Dis.
Volume: 5
Pages: 268
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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