2019 Fiscal Year Research-status Report
Role of red blood cells and platelets in the development of chronic inflammation of nonalcoholic steatohepatitis
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17K09437
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| Research Institution | Osaka City University |
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Principal Investigator |
藤井 英樹 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (20382070)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松原 三佐子 (佐藤) 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 特任講師 (00635120)
LE THITHANHTHUY 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 特任講師 (10572175)
松原 勤 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (20628698)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 老化 / 脂肪肝炎 / 肝線維化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は、若齢 (8週齢)および高齢 (65週齢)のC57BL/6マウスに通常食ならびに高脂肪高コレステロール食 (以下NASH食)を16週間投与したところ、通常食投与では高齢マウスで軽度の肝内脂肪沈着がおこった程度だったが、NASH食を投与したところ、高齢マウスにおいて若齢に比し明らかに脂肪肝炎の肝線維化および病勢 (activity)が進行した(図1, 2. 第55回日本肝臓学会総会、PD7-5、2019年)。肝線維化に関しては、NASH食投与若齢マウスに比し高齢マウスではTgf-beta1やCol1a1のmRNAレベルが有意に上昇することを確認している。本モデルの病態を解明する目的で、肝組織を用いたメタボローム解析およびRNAseqを施行し、「老化のみでは変化せず、老化+NASH刺激で特異的に変化する遺伝子および代謝産物」を探索したところ、①メタボロームにおける候補の一つとして、食事脂質に由来する脂肪酸の一つであるリノール酸がピックアップされた。リノール酸は通常食を投与されたマウスでは若齢に比し高齢では２倍程度に上昇した。一方、NASH食群では高齢の方が若齢よりも有意に高値であった。②RNASeqでは高齢NASH食/若齢NASH食においてリノール酸合成に関与する遺伝子であるElovl3とACSl1が有意に減少した(-17.68倍, p 9.5E-18, -2.37倍, 9.5E-18)。以上の結果から、「老化による不飽和脂肪酸の代謝変化が脂肪肝炎における肝線維化を促進するのではないか？」という仮説を導き出し、更なる解析を続けている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
①本年度は、昨年度に引き続きNASHの病態解明の過程で赤血球血栓や血小板血栓に拘泥しすぎず、a)若齢通常食、b)高齢通常食、c)若齢NASH食、d)高齢NASH食の4群間比較で「老化のみでは変化せず、老化+NASH刺激で特異的に変化する遺伝子および代謝産物」を探索している。再現性のある遺伝子の調整が遅れたため、この他にもある遺伝子候補を絞り切れていないのが遅れの原因となっている。
②動物モデル自体は完成しているので、今後スピードアップして検討を進めていきたい。
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| Strategy for Future Research Activity |
①老化に伴う代謝変化と血清および肝組織中リノール酸濃度との関係性を検討する。
②リノール酸が肝線維化を抑制する分子機序として、脂肪酸代謝の変化に伴う脂質過酸化促進→酸化ストレスの増幅を疑っている。このため、過酸化脂質の定量や脂質過酸化反応過程で生じるラジカル基の検出、定量を行う。更に肝組織や血清中の8-OHdGや4-HNE等の酸化ストレス関連物質を測定する。
③老化の指標として肝組織のSA-beta-gal染色を施行し、線維化の指標であるSirius red染色やalpha-SMA染色の陽性面積率との対比を行う。
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| Causes of Carryover |
マウスNASHモデルを作成するにあたり、現時点で加齢に伴う病態の増悪の可能性を強く疑っている。加齢の肝線維化に与える影響の解析に当初の予想以上に時間を要している。これまでにマイクロアレイやRNAseq等の手法で解析を行ない、現時点で加齢により特異的に肝線維化を進展させる遺伝子候補をいくつか絞り込むところまでは進んだものの、その候補遺伝子の役割の解析が済んでいない状況である。
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Research Products
(1 results)
