Elucidation of the effect of S1PR2 on the disease specificity and pathophysiology of primary biliary cholangitis and its application to therapy

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17K09458
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 川田 一仁 浜松医科大学, 医学部附属病院, 助教 (90722968)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小林 良正 浜松医科大学, 医学部, 助教 (50252185) [Withdrawn] ; 則武 秀尚 浜松医科大学, 医学部, 助教 (10467235)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 原発性胆汁性胆管炎 / S1PR2

Outline of Annual Research Achievements

本研究では原発性胆汁性胆管炎(PBC)肝内胆管細胞のS1PR2の発現や機能を検討し疾患特異性から病態解明まで行い、さらに新規治療を創出することが目標である。
in vitroで、Human intrahepatic cholangiocarcinoma cell lineであるHuCC-T1 cellsを用いて、肝内胆管細胞へのLPS刺激によるT細胞の遊走能に及ぼす影響について、CX3CL1とCCL2の発現を中心にS1PR2 antagonist JTEが及ぼす作用について検討した。2019年度に引き続き、LPS刺激によるHuCC-T1 cells中のCX3CL1、CCL2の上昇を抑制するメカニズムについて検討した。まず初めに焦点を当てたNFkBを介さないことを確認にしたので、次にSTAT3に着目した。HuCCT-1の核内のリン酸化STAT-3の発現をWestern Blotで確認した。JTEを投与する事でHuCCT-1の核内のリン酸化STAT-3の発現は行進し、LPSと共にJTEを投与しても同様にリン酸化STAT-1の発現が行進していた。従って、JTEはNFkBを介さず、STAT-3をリン酸化することでLPSにより発現が上昇したCX3CL1とCCL2の発現を抑制していることが示唆された。また、2019年度と同様にHuCC-T1 cellsとヒトT cell lymphomaのcell lineであるJurkat cellsを用いてChemotaxis assayを行った。HuCCT-1のLPS刺激によりケモカイン産生が行進され、Jurkat cellsの遊走能が優位に上昇するが、LPS+JTEにて上昇していた遊走能は優位に低下した。以上より、JTEが肝内胆管細胞のLPS誘導CX3CL1とCCL2産生をSTAT-3のリン酸化を介して抑制し、T 細胞の遊走を低下させることが解明された。