2020 Fiscal Year Annual Research Report
Investigation of the roles of bone marrow-derived fibroblasts/myofibroblasts and their molecular mechanism in the carcinogenesis of mouse models of pancreatic cancer
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17K09460
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
高石 繁生 京都大学, 医学研究科, 特定准教授 (20596829)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 膵癌自然発症マウス(KPC) / ヒト及びマウス膵癌培養細胞 / ヒト膵癌オルガノイド / COX-1, -2遺伝子 / CAGE法遺伝子解析 / 膵癌幹細胞 / 上皮間葉転換関連転写因子(EMT-TFs) / SNAIL2(=SLUG)遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の当初のテーマは下記であった：A)膵癌自然発症マウスにおける骨髄由来腫瘍関連筋線維芽細胞およびCox-1, -2遺伝子の役割を明らかにする。B)ヒト膵癌幹細胞におけるCOX-1, -2遺伝子の機能を解析する。その結果 A:膵臓特異的Cre発現マウス(Ptf1a-Cre), 条件的KrasG12D発現マウス(LSL-KrasG12D), 条件的p53ノックアウト(KO)マウス(p53f/+)を交配させ(KPC)、膵癌の発症を確認したが、条件的Cox-1 KOマウス(Ptgs1f/f) and/or 条件的Cox-2 KOマウス(Ptgs2f/f)との交配はコロニーの維持・拡大が難しかった。B:ヒト膵癌培養細胞株およびヒト膵癌手術検体から樹立した3次元オルガノイドを用いてCox-1,-2遺伝子の発現を解析したが、前者の発現は認められず後者の発現はわずかであったため機能解析には至らなかった。
そこでテーマを下記に変更した:C)2種類の膵癌マウスから各々樹立した培養細胞株PanIN-PC(KPCマウス由来),IPMN-PC(Ptf1a-Cre+;LSL-KrasG12D+;Brg1f/fマウス由来)に関してCap Analysis of Gene Expression (CAGE)法による遺伝子発現解析にて各細胞の特徴付けを行う。D)癌幹細胞分画を有するヒト膵癌培養細胞株KLM-1,KMP-5およびヒト膵癌オルガノイドを用いて上皮間葉転換関連転写因子(EMT-TFs)の発現を解析し、膵癌幹細胞の恒常性維持における役割を探求する。その結果 C: PanIN-PCでは幹細胞関連の遺伝子が高発現し、IPMN-PCではAktシグナルへの依存が強かった。D: EMT-TFsの中でSNAIL2(=SLUG)が最も高発現しており、そのノックダウンにより腫瘍形成能と抗癌剤への耐性が減弱した。
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Research Products
(2 results)
