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2019 Fiscal Year Annual Research Report

Development of a novel T cell-oriented vaccine using CTL/Th-bi-epitope long peptide and biodegradable microparticles, against an intracellular bacterium

Research Project

Project/Area Number 17K09650
Research InstitutionHamamatsu University School of Medicine

Principal Investigator

榎本 紀之  浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (50436961)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 須田 隆文  浜松医科大学, 医学部, 教授 (30291397)
永田 年  浜松医科大学, 医学部, 教授 (90275024)
Project Period (FY) 2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords生分解性ナノ粒子 / バイエピトープ長鎖ペプチド / 細胞内寄生菌 / ワクチン
Outline of Annual Research Achievements

生分解性ナノ粒子(polylactic coglycolic acid: PLGA)によりコートされた卵白アルブミン(OVA)由来の細胞障害性T細胞(CTL) およびヘルパーT細胞(Th)エピトープを連結したバイエピトープ長鎖ペプチド(long peptide)を作成し、骨髄由来の樹状細胞(BMDC)へパルスしたところ、OT-I細胞(OVA特異的CTL)に加え、OT-II細胞(OVA特異的Th)の強い増殖能を確認した。この効果はshort peptideの混合(CTL+Th) + PLGAあるいはlong peptide単独よりも高かった。また、PLGAの細胞内局在を確認するため、蛍光標識したPLGAをin vitroにてBMDCと2時間反応させたところ、蛍光顕微鏡にてBMDCの食胞内のエンドゾーム/ライソゾームと共に存在するPLGAを確認した。
さらに細胞内寄生感染症のモデルであるリステリアのlong peptideをPLGAに結合し、BMDCへパルスしマウスへ皮下注射したところ、脾臓におけるリステリア特異的なリンパ球増殖とインターフェロンγ産生を認めた。加えてlong peptide + PLGAをパルスしたBMDCをマウスへ皮下注射したところ、リステリア感染マウスでの脾臓での有意な菌量低下を確認した。Long peptide + PLGAによる明らかな副作用は出現しなかった。
以上の結果から、long peptide + PLGAによるワクチン療法は、安全かつ有効な新規ワクチンとしての利用が期待できると考えられた。

上記の実験を繰り返し実施し、再現性を確認した。

URL: 

Published: 2021-01-27  

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