2018 Fiscal Year Research-status Report
Neutrophils in mediastinal lymph node mediates innate immune response during pneumococcal pneumonia.
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17K09659
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
山本 和子 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (10398167)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井手口 周平 長崎大学, 病院(医学系), 医員 (50796224)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 肺炎球菌肺炎 / 侵襲性肺炎球菌感染症 / 縦隔リンパ節 / 好中球 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1. 肺炎マウスで縦隔リンパ節好中球の免疫における特異性を発見し、肺リンパ内皮細胞（LEC）の単離に成功し、肺LEC由来ケモカインによって縦隔リンパ節に好中球が集まる経路を証明した。
①C57BL/6 マウスに肺炎球菌血清型 19Fを気管内投与し、15 時間後に MLN・血液・気管支肺胞洗浄液をそれぞれ採取し、 FACS 法を用いて好中球(CD45+Ly6G-1A8+細胞)を単離した。②好中球は肺炎後に縦隔リンパ節に集まることを示した。 ③Lung digest法及びFACS法を用いて、肺内のLECの単離に成功した。④肺LEC細胞は好中球ケモカイン（CXCL1, CXCL5, G-CSF）を発現することを証明した。
2. 本研究に関連して、以下の論文を報告した。
Smith NMS, WassermanGA, Coleman FT, Hilliard KL, Yamamoto K, Lipsitz E, Malley R, Dooms H, Jones MR, Quinton LJ, Mizgerd JP. Regionally compartmentalized resident memory T cells mediate naturally acquired protection against pneumococcal pneumonia. Mucosal Immun 11(1):220-235, 2018.
3. 本研究に関連して、以下の発表を行なった。
①Yamamoto K. The impact of neutrophil recruitment in mediastinal lymph node to invasive pneumococcal pneumonia. 第58回 日本呼吸器学会学術講演会（大阪）呼吸器領域若手グローバル研究者シンポジウム(2018年4月27日). ②Shuhei Ideguchi, Kazuko Yamamoto, et al.The capacity of pneumococcus to stimulate macrophage NF-kappa B activity dictates the severity of adult pneumococcal pneumonia. American Thoracic Society (ATS) 2018(2018年5月22日). ③山本和子. 肺炎の免疫治療の可能性. 肺炎球菌肺炎の免疫応答を参考に. 第81回日本呼吸器学会 秋季九州地方会(2018年10月6日)
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
上述したように、肺炎マウスで縦隔リンパ節好中球の免疫における特異性及び肺リンパ内皮細胞がケモカインを産生する機能を発見し、研究を進めている。また、本研究に関連した学術論文をインパクトの高い一流国際誌に掲載した。さらに、国内の学術講演会でのシンポジウムでも発表を行った。研究成果は順調に得ているが、ボストン大学からRelAf/fマウスを譲受して行うLEC RelA欠失マウスの作成が、輸送の手続き等により遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
1. 肺炎球菌肺炎マウスモデルの感染15 時間後にMLN、脾臓を採取し（非感染コントロールマウスからも同様に採取)、組織固定後に B220 抗体(B 細胞)、CD3 抗体(T 細胞)、CD169 抗体(マクロファージ)、MPO 抗体(好中球)を蛍光染色し、電子顕微鏡を用いて好中球のリンパ組織内の局在場所について調べる。
2. ノックアウトマウス作成の準備を行う。
LEC 由来のケモカインを特異的に欠失するマウスとして LEC RelA 欠失マウス(Prox1-Cre/Relaf/f マウス)を作成する。共同研究先であるボストン大学の所持する Rela-floxed マウスを用いて、Prox1-Cre/Relaf/f マウスを作成する。
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| Causes of Carryover |
当初は平成30年度にノックアウトマウス作成を行う予定であったが、RelAf/fマウス輸送等の手続きが滞り、C57BL6マウスを用いた実験を主に行なったため、残額が生じた。次年度はノックアウトマウス作成及びフローサイトメトリー費用に予算を用いる予定である。
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[Journal Article] Regionally compartmentalized resident memory T cells mediate naturally acquired protection against pneumococcal pneumonia.2018
Author(s)
Smith NMS, WassermanGA, Coleman FT, Hilliard KL, Yamamoto K, Lipsitz E, Malley R, Dooms H, Jones MR, Quinton LJ, Mizgerd JP.
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Journal Title
Mucosal Immunity
Volume: 11
Pages: 220-235
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Examination of cryptococcal glucuronoxylomannan antigen in bronchoalveolar lavage fluid for diagnosing pulmonary cryptococcosis in HIV-negative patients.2018
Author(s)
Oshima K, Takazono T, Saijo T, Tashiro M, Kurihara S, Yamamoto K, Imamura Y, Miyazaki T, Tsukamoto M, Yanagihara K, Mukae H, Kohno S, Izumikawa K
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Journal Title
Medical Mycology
Volume: 56
Pages: 88-94
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Clinical and Microbiological Characteristics of Candida guilliermondii and Candida fermentati.2018
Author(s)
Hirayama T, Miyazaki T, Yamagishi Y, Mikamo H, Ueda T, Nakajima K, Takesue Y, Higashi Y, Yamamoto Y, Kimura M, Araoka H, Taniguchi S, Fukuda Y, Matsuo Y, Furutani A, Yamashita K, Takazono T, Saijo T, Shimamura S, Yamamoto K, Imamura Y, Izumikawa K, Yanagihara K, Kohno S, Mukae H
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Journal Title
Antimicrobial Agents Chemotherapy
Volume: 62
Pages: 02528-17
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] The capacity of pneumococcus to stimulate macrophage NF-kappa B activity dictates the seveerity of adult pneumococcal pneumonia2018
Author(s)
Kazuko Yamamoto, Shuhei Ideguchi, Shotaro Ide, Takahiro Takazono, Tomomi Saijo, Yoshifumi Imamura, Taiga Miyazaki, Katsunori Yanagihara, Yuichi Fukuda, Bin Chang, Fadie T. Coleman, Joseph P. Mizgerd, Hiroshi Mukae
Organizer
Gordon Research Conference 2018, Biology of Acute Respiratory Infection
Int'l Joint Research
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[Presentation] The capacity of pneumococcus to stimulate macrophage NF-kappa B activity dictates the seveerity of adult pneumococcal pneumonia2018
Author(s)
Shuhei Ideguchi, Kazuko Yamamoto, Shotaro Ide, Takahiro Takazono, Tomomi Saijo, Yoshifumi Imamura, Taiga Miyazaki, Katsunori Yanagihara, Yuichi Fukuda, Shigeki Nakamura, Bin Chang, Fadie T. Coleman, Joseph P. Mizgerd, Hiroshi Mukae
Organizer
American Thoracic Society (ATS) 2018
Int'l Joint Research
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