2019 Fiscal Year Annual Research Report
Mechanisms of endostatin and microRNAs in pulmonary fibrosis
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17K09675
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| Research Institution | Nippon Medical School |
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Principal Investigator |
吾妻 安良太 日本医科大学, 医学部, 教授 (10184194)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
神尾 孝一郎 日本医科大学, 医学部, 講師 (20465305)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | エンドスタチン / 筋線維芽細胞 / 上皮間葉転換 / エクソソーム / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
① ヒト肺線維芽細胞株を用いて、fibroblastのmyofibroblast への分化への影響を検討した。線維芽細胞をエンドスタチンで前処理後にTGF-beta 1を添加したが、alpha smooth muscle actinの発現に変化は見られず、筋線維芽細胞への分化は抑制されなかった。またヒト肺胞上皮細胞株を用いて、上皮間葉転換へのエンドスタチンの影響を検討した。A549細胞をエンドスタチンで前処理後にTGFーbeta 1を添加したが、E-cadherinの低下やVimentinの増加に変化は見られず抑制されなかった。
② 肺線維症モデルマウスを用いて、エクソソーム由来のmicroRNAとの関連を解析した。
まずC57BL/6マウスで、浸透圧ポンプを用いてブレオマイシン（BLM）誘発肺線維症モデルマウスを作成して、エクソソーム由来のマイクロRNAの経時的な変化を観察した。BLM投与前（day 0）、投与後day7,14, 21, 28にマウスの血清からexosomeを単離した。その後exosome中のmicroRNAを抽出し、microRNA arrayで解析した。BLM投与後７日目に、miR-22の有意な上昇を認めた。ヒト肺線維芽細胞を用いた検討では、miR-22はTGF-beta1により誘導される筋線維芽細胞への分化を抑制したが、これはmiR-22によるERK1/2経路の抑制である事が確認された。さらにmiR-22は、TGF-beta1の存在下でconnective tissue growth factor (CTGF)の発現を抑制した。BLM肺線維症モデルマウスにday10に尾静脈よりmiR-22を投与した所、肺線維化は有意に抑制され、alpha smooth muscle actinの低下を伴っていた。
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