2019 Fiscal Year Annual Research Report
The role of Skp2 in macrophage proliferation in atherosclerotic lesion
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17K09863
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
石井 規夫 熊本大学, 病院, 特任助教 (10599111)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
瀬ノ口 隆文 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 助教 (00530320)
近藤 龍也 熊本大学, 病院, 講師 (70398204)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | マクロファージ / 細胞周期 / 動脈硬化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【動脈硬化病変局所におけるSkp2-p27kip経路および細胞周期の評価】
動脈硬化モデルマウス(Apo E KOマウス)にhigh fat dietを行い動脈硬化症モデルマウスとして血管病変局所でのp27kipおよびSkp2の発現評価をするために、大動脈弁輪部の連続切片を用いてMφの表面抗原マーカー(CD11b)と細胞周期進行のマーカー(PCNA)・p27kip抗体・Skp2抗体で多重免疫染色を行ったところ動脈硬化弁輪部で増殖Mφに一致したSkp2の発現を認めた。AMPK活性化剤AICARおよびアデノウイルスベクターを用いて恒常活性型constitutively active mutant(T172D) -AMPKα(CA-AMPK)、優位抑制型dominant negative mutant(T172A)-AMPKα(DN-AMPK)を過剰発現することでAMPK活性制御を行い、増殖抑制状態のマウス腹腔マクロファージを用いて、細胞増殖の評価を、[3H]チミジン取り込み法、細胞数算定法を用いて行った。増殖誘導刺激(Ox-LDL、GM-CSF)により有意に細胞増殖が誘導された。細胞周期の評価を、Propidium iodideを用いたFlow cytometry法で行った。増殖誘導刺激(Ox-LDL、GM-CSF)により優位に細胞周期G2/M期の細胞が増加していた。増殖刺激で増加したSkp2の発現はAMPK活性誘導により部分的に抑制された。p27kipは元々の発現が弱く増殖刺激での変化は観察されなかったがAMPK活性誘導によりその発現が増加した。またSkp2によるp27kipのユビキチン化とマクロファージ増殖能との関連を解明するためp27kip抗体で免疫沈降を行い、ユビキチン抗体でユビキチン化を定量化した。増殖抑制状態のマクロファージではp27kipのユビキチン化が増加した。
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[Journal Article] Comparison of the efficacy and safety of once-daily insulin degludec/insulin aspart (IDegAsp) and long-acting second-generation basal insulin (insulin degludec and insulin glargine 300 units/mL) in insulin-naive Japanese adults with type 2 diabetes: a pilot, randomized, controlled study.2019
Author(s)
Shimoda S, Sakamoto W, Hokamura A, Matsuo Y, Sekigami T, Ichimori S, Iwashita S, Ishii N, Otsu K, Yoshimura R, Nishiyama T, Sakaguchi M, Nishida K, Araki E.
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Journal Title
Endocr J.
Volume: 29;66(8)
Pages: 745-752.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Pioglitazone suppresses macrophage proliferation in apolipoprotein-E deficient mice by activating PPARγ.2019
Author(s)
Murakami-Nishida S, Matsumura T, Senokuchi T, Ishii N, Kinoshita H, Yamada S, Morita Y, Nishida S, Motoshima H, Kondo T, Komohara Y, Araki E.
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Journal Title
Atherosclerosis.
Volume: 286
Pages: 30-39
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Impacts of the 2016 Kumamoto Earthquake on glycemic control in patients with diabetes.2019
Author(s)
Kondo T, Miyakawa N, Motoshima H, Hanatani S, Ishii N, Igata M, Yoshinaga K, Kukidome D, Senokuchi T, Kawashima J, Furukawa N, Matsumura T, Araki E.
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Journal Title
J Diabetes Investig.
Volume: 10(2)
Pages: 521-530.
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Effects of linagliptin on macrophages and on progression of atherosclerosis in high fat-fed apoE-deficient mice.2019
Author(s)
Nishida S, Matsumura T, Senokuchi T, Ishii N, Murakami-Nishida S, Yamada S, Morita Y, Wada T, Motoshima H, Kondo T, Araki E
Organizer
The 11th Scientific Meeting of the Asian Association for the Study of Diabetes. 2019/5/23,
Int'l Joint Research
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[Presentation] Pioglitazone Suppresses Macrophage Proliferation in Apolipoprotein-e Deficient Mice by Activating PPARγ.2019
Author(s)
Murakami-Nishida S, Matsumura T, Nishida S, Senokuchi T, Ishi N, Yamada S, Morita Y, Wada T, Motoshima H, Kondo T, Araki E
Organizer
The 79th ADA Scientific Meetng. 2019/6/8
Int'l Joint Research
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[Presentation] Linagliptin induces M2 macrophage polarization and suppresses progression of atherosclerosis in high fat-fed apoE-deficient mice.2019
Author(s)
Nishida S, Matsumura T, Senokuchi T, Ishii N, Murakami-Nishida S, Yamada S, Morita Y, Wada T, Motoshima H, Kondo T, Araki E
Organizer
The 79th ADA Scientific Meeting. 2019/6/10
Int'l Joint Research
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