2019 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of hematopoietic regulation mechanisms by a novel repressor for RUNX1
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17K09936
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
吉田 達士 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80315936)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奥田 司 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30291587)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | RUNX1 / 白血病 / 転写制御 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
RUNX1は造血細胞・免疫細胞の分化制御に関わる転写因子であり、白血病における遺伝子異常の標的となっている。我々は、RUNX1に結合するタンパク質CRP1を見出し、この因子がRUNX1の機能に及ばす作用を解析した。この因子は、RUNX1の転写調節機能を抑制する働きを持つ阻害因子であることを見出した。RUNX1の片アレルの変異では骨髄異形成症候群や白血病発症リスクが高まることから、RUNX1とCRP1の結合阻害はRUNX1の機能を回復させて発症リスクを軽減できると考えた。そこで、RUNX1とCRP1結合を阻害する化合物をスクリーニングするためのアッセイ系の構築を行った。Fluorescence Resonance Energy Transfer(FRET)によってRUNX1とCRP1結合を解析するために、蛍光タンパク質EGFP, ERFP, ECFPおよびEYFPと融合させたRUNX1およびCRP1発現ベクターを構築した。また、ポジティブコントロールとして蛍光タンパク質とCBFβの融合タンパク質発現ベクターも構築した。これらのコンストラクトが機能することを発現細胞を蛍光顕微鏡下で観察することによって確認した。またFRET解析に用いるためのin cell analyzerのFRETシステムが導入され、これらを用いて解析中である。また、昨年度と異なるタイプのRUNX1遺伝子改変マウスとCRP1遺伝子改変マウスを交配させ、RUNX1の造血発生異常を改善するという予備的データが得られた。交配マウスの作成に時間がかかってはいるが、さらに交配マウスを増やしてデータの確認を行う予定である。
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