2017 Fiscal Year Research-status Report
自己免疫性関節炎におけるIL-33-自然リンパ球経路の役割の解明
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17K09970
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
高取 宏昌 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任講師 (30568225)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
廣瀬 晃一 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任教授 (90400887)
鈴木 浩太郎 千葉大学, 大学院医学研究院, 准教授 (90554634)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 自然リンパ球 / 関節炎 / IL-33 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
関節リウマチ患者 79 例の PBMCs の DNA マイクロアレイ解析において疾患活動性(DAS28-ESR)と発現 が相関する遺伝子(DNA マイクロアレイ法)と、IL-33 刺激によりマウス ILCs で有意に発現誘導 される遺伝子(RNA シークエンス法)を網羅的に比較解析し、両データベースで共通する遺伝子 を 158 個抽出した。これらの遺伝子のうち両データベースで上位に入り、RA の病態への関連が推 測される候補分子（CD63, P4HB, RAB31, HCFC1R1, STOM, TOX2, TPI1, HMOX1）を 選択した。
その後、健常者と関節リウマチ症例のPBMCsからILC1s、ILC2s、ILC3sの各 ILCs サブセットを単離し、候補分子の発現レベルを qPCR 法により解析している。また、それらの発現レベルと様々な臨床指標 (DAS28-ESR, 関節エコー所見, CRP, MMP-3, 抗 CCP 抗体, RF 等)との相関を解析している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
健常人の末梢血におけるILCsとともにマウスの各臓器におけるILCsの同定は予定通り順調に施行することができ、単離による解析が可能となってきているため研究は概ね順調に進展していると考える。しかし、関節リウマチ症例の関節滑液中のILCsの同定と単離が困難のため一部研究が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
1. マウスリンパ組織、腸管、肺からもILC1s, ILC2s, ILC3sを単離し、生型 (WT) マウスの関節組織、リンパ節、腸管、肺よりCD45.2+ CD127+ Lin- (CD3ε-, CD4-, CD8α-, CD19-, CD5-, B220-, CD11b-, CD11c-, CD49b-, FcεRI-, TER119-, TCRαβ-, TCRγδ-, GR-1-) ILCsをFACS sortingにより単離する。ILCsをIL-33の存在下で培養し、上記候補分子の発現をmRNAレベル、及びタンパクレベルで検討する。また、ILCsに候補分子を強制発現した際の、サイトカイン産生への影響をタンパクレベルで検討する。
2. コラーゲン誘導性関節炎(CIA)を誘導したWTマウスの関節組織、リンパ節よりILCsを単離を単離し、上記候補分子の発現をmRNAレベル、及びタンパクレベルで検討する。また、ILCsに候補分子を強制発現させ、CIAを誘導し たWTマウスに養子移入した際の影響を病理組織学的に解析する。
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| Causes of Carryover |
遺伝子改変マウスが入手できなかったため。遺伝子改変マウスが入手できれば、同マウスからILCsを単離しIL-33で刺激した際の遺伝子発現を解析する。また同マウスに関節炎を誘導し病態を解析する。
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Research Products
(5 results)
