2017 Fiscal Year Research-status Report
Immunologic function of podocytes in lupus nephritis
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17K09977
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
一瀬 邦弘 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 講師 (60437895)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 全身性エリテマトーデス / ループス腎炎 / SLAMF6 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【目的】全身性エリテマトーデス(SLE)におけるループス腎炎(LN)は生命予後を規定する重篤な病態である。LNの蛋白尿が出現する機序として、糸球体上皮細胞(ポドサイト)の形態・機能異常に起因する構造蛋白の発現低下が報告されている。SLE患者のCD4陽性T細胞ではSignaling lymphocyte activation molecule family 6 (SLAMF6) の発現が亢進し、IL-17産生に関与していることが報告されている。今回、我々はSLAMF6に着目し、LNにおけるポドサイトの機能的意義を検討した。
【方法】健常人とLN患者及びB6マウスとMRL/lprマウスの腎組織を用いてポドサイトマーカーであるnephrinとSLAMF6の共発現を検討した。またB6マウスとMRL/ lprマウスのポドサイトと腎臓、脾臓由来のCD4+Tリンパ球におけるSLAMF6発現をフローサイトメーターで解析した。更にヒトポドサイトを健常人及びLN患者由来のIgGとインキュベートし、real-time PCRを用いてSLAMF6の発現を検討した。
【結果】LN患者及びMRL/lprマウスの腎組織では、対照群と比較してnephrin陽性細胞におけるSLAMF6の発現が強く認められた。またポドサイトと腎臓、脾臓由来のCD4+Tリンパ球で、対照群に比して、SLAMF6の発現が亢進していた。更にヒトポドサイトではLN患者IgGによるSLAMF6 mRNA発現誘導が確認された。
【結論】LNのポドサイトではSLAMF6発現が亢進しており、CD4+Tリンパ球と協同して、機能異常に寄与している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
仮説として挙げていたSLEモデルマウスMRL/lprにおける脾臓および腎臓のSLAMF6発現がコントロール群と比較して、亢進していたことを確認できた。またセルソーターにて腎臓のポドサイトの単離を行っているが、その条件設定が完了し、今後の細胞分収後の実験計画を立てることが可能になった。
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| Strategy for Future Research Activity |
コントロールマウスおよびMRL/lprマウスから分収したポドサイトを用いたマイクロアレイ解析を行う。
またin vitroの実験系ではマウスのprimaryポドサイトを用いて、抗SLAMF6抗体とインキュベートし、nephrinシグナルとの関連についても検討を行う。ポドサイトにおけるSLAMF6発現をsi-RNAを用いてノックダウンし、in vitroのレベルでcell survival markerの回復が認められるかどうかについても確認する。これらの実験系はProf. George C. Tsokos (Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School, Boston)らのグループと連携しながら進めていく予定である。
次にC57BL/6バックグランドSLAMF6ノックアウトマウスを入手し(The Jackson laboratoryで入手可能)、MRL/lprマウスをバックグラウンドとして、8-10世代までバッククロスを行う。そのマウスを用いて、蛋白尿の推移、発症前(6週齢前後)、発症後(12-16週齢)の腎組織変化を検討したいと考えている。同時にCD4+リンパ球の活性化、Th17細胞の分化能などの免疫担当細胞の機能についても検討したい。さらにMRL/MPJ, MRL/lpr, MRL/lpr.SLAMF6-/-の各マウスの腎組織において、ポドサイトマーカーであるnephrin、podocinなどの発現を検討する。
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[Journal Article] The efficacy of adjunct tacrolimus treatment in pregnancy outcomes in patients with systemic lupus erythematosus.2018
Author(s)
Ichinose K, Sato S, Kitajima Y, Horai Y, Fujikawa K, Umeda M, Fukui S, Nishino A, Koga T, Kawashiri SY, Iwamoto N, Tamai M, Nakamura H, Origuchi T, Yasuhi I, Masuzaki H, Kawakami A.
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Journal Title
Lupus.
Volume: 27
Pages: 1312-1320
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] CD4+ CD52lo T-cell expression contributes to the development of systemic lupus erythematosus.2018
Author(s)
Umeda M, Koga T, Ichinose K(corresponding author), Igawa T, Sato T, Takatani A, Shimizu T, Fukui S, Nishino A, Horai Y, Hirai Y, Kawashiri SY, Iwamoto N, Aramaki T, Tamai M, Nakamura H, Yamamoto K, Abiru N, Origuchi T, Ueki Y, Kawakami A.
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Journal Title
Clin Immunol.
Volume: 187
Pages: 50-57
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Novel anti-suprabasin antibodies may contribute to the pathogenesis of neuropsychiatric systemic lupus erythematosus.2018
Author(s)
Ichinose K, Ohyama K, Furukawa K, Higuchi O, Mukaino A, Satoh K, Nakane S, Shimizu T, Umeda M, Fukui S, Nishino A, Nakajima H, Koga T, Kawashiri SY, Iwamoto N, Tamai M, Nakamura H, Origuchi T, Yoshida M, Kuroda N, Kawakami A.
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Journal Title
Clin Immunol.
Volume: 印刷中
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] 神経精神ループスにおける新規自己抗体 -抗suprabasin抗体の有用性-2017
Author(s)
一瀬邦弘, 大山要, 來留島章太, 高谷亜由子, 清水俊匡, 梅田雅孝, 福井翔一, 西野文子, 古賀智裕, 川尻真也, 岩本直樹, 井川敬, 玉井慎美, 中村英樹, 折口智樹, 川上純
Organizer
第61回日本リウマチ学会総会・学術集会
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