2018 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of lethal intravascular hemolysis mechanism in Clostridium perfringens sepsis
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17K10034
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
須崎 愛 日本大学, 医学部, 准教授 (90251454)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
早川 智 日本大学, 医学部, 教授 (30238084)
相澤 志保子 日本大学, 医学部, 准教授 (30513858)
TRINH DUYQUANG 日本大学, 医学部, 助教 (90647190)
神谷 茂 杏林大学, 保健学部, 教授 (10177587)
大谷 郁 東海大学, 医学部, 准教授 (30377410)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | ウェルシュ菌 / 敗血症 / 血管内溶血 / 溶血毒 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒトに対して食中毒やガス壊疽の原因菌として知られるウェルシュ菌には、頻度は少ないものの重篤な敗血症を生ずることがあり、特に著しい血管内溶血を生じた症例での電撃的な経過についての知見は、未だない状態である。
昨年度から行なっている増殖実験で、臨床分離株がJCM株に比べて増殖速度が早い傾向にあり、臨床分離株の中で増殖速度が目立って遅い株は、非溶血群のものであった。
今年度はDNAを抽出して、溶血群と非溶血群での既知の病原性関連遺伝子（θ毒素、κ毒素、ヒアルロニダーゼ遺伝子等）や病原性関連調節遺伝子(二成分制御系virR/virS 遺伝子やVRRNA)の遺伝子レパートリーの解析を行なった。菌株によってそれぞれに発現の違いを認めたが、溶血群と非溶血群の群間で検討したところでは、有意な差は認められなかった。
個々の菌株の検討で明らかな差異が認められないため、菌株より宿主要因の影響の方が大きい可能性を否定できず、宿主要因の検討が必要と考えた。しかしそれぞれの菌株の宿主である患者検体が残っていないため、ウェルシュ菌菌血症患者10年分についてカルテベースでの検討を加えた。溶血群と非溶血群の患者群間で、既往歴や基礎疾患での違いはなかったが、溶血群患者において発症年齢に若い傾向が認められた。
これは溶血群と非溶血群の菌群間に、毒素や病原因子の違いが存在し、それによる宿主の反応が存在する傍証と考えられたため、再度ウェルシュ菌側の病原因子について検討を進めていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
検討対象である血管内溶血を引き起こす劇症型敗血症からの分離株でも、臨床分離株であるためそれぞれの性状の違いがあり、その割には菌株数が限定されていることから、溶血群での共通点と、非溶血群との差異について、傾向はあっても有意差を明らかにするのが困難である。
また劇症型の血管内溶血には、菌株の性状だけではなく、生体側の反応も加わっていると考えられたが、稀な疾患である、宿主が短時間で死亡していることなどから、宿主側の検体や情報が得難く、それも解析が困難な理由の一つと考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度の検討で、溶血群と非溶血群の菌群間では既知の病原性関連遺伝子（θ毒素、κ毒素、ヒアルロニダーゼ遺伝子等）や病原性関連調節遺伝子(二成分制御系virR/virS 遺伝子やVRRNA)の遺伝子レパートリーには明らかな差異が認められず、患者因子の検討で、溶血群と非溶血群に年齢以外の差はでなかった。今後再度ウェルシュ菌側の毒素・病原因子の検討を行う予定であるが、細菌培養上清中に含まれるα-toxin量について、条件によっては溶血群と非溶血群で違いが出る傾向があるため、遺伝子以外のELISAやWestern Blotting等のアプローチ法で検討を進める予定である。
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| Causes of Carryover |
溶血群と非溶血群間での宿主要因の違いを調査するため、カルテベースでの検討を加えた。それにより当初予定していた、ヒト培養細胞からウェルシュ菌培養上清で誘導されるサイトカイン産生実験に必要な、細胞株、細胞培養用培地、サイトカイン測定ELISAキットの購入が次年度に変更になった。これらについては年度始めから、購入・使用予定である。
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Research Products
(1 results)
