2018 Fiscal Year Research-status Report
横紋筋肉腫におけるRAS変異に基づいたプレシジョン医療開発のための基礎的検討
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17K10123
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
菊地 顕 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任助教 (40453104)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柳生 茂希 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10572547)
細井 創 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20238744)
家原 知子 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20285266)
宮地 充 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40584983)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 横紋筋肉腫 / MEK阻害剤 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
横紋筋肉腫（RMS）は、近年の集学的治療の進歩により約80%の長期生存が望めるようになったが、治療の合併症による性腺機能不全や恒常的な臓器機能欠損が深刻な問題となっており、副作用の少ない特異的な治療の開発が望まれている。プレシジョン医療とは、患者の個人差を考慮し、遺伝子診断などによって得られた遺伝子情報に基づきその患者に有効と考えられる特異的で副作用の少ない治療法を設定する医療であり、近年日本でも積極的に議論されるようになってきた。一方、小児がんの分野では、その腫瘍遺伝的バックグランドの多様性から、本来プレシジョン医療の適応があると考えられるが、いまだ十分に検討が行われているとはいえない。本研究ではRAS変異に基づいたプレシジョン医療開発のための基礎的検討を行うことを目的としている。具体的には
1.横紋筋肉腫細胞株を使い、RAS変異の有無での各種RAS-RAF-MEK阻害剤の効果の違い、分子生物学的変化の違いをin vitro, in vivoで確認する。
2. 迅速簡便なRAS-RAF変異の検索方法の確立のため、患者血漿遊離DNAを用いたデジタルPCRでの検出法を確立する。
今年度は、1についてRMS細胞株11種類のRAS-RAF経路変異の有無とRAF-MEK阻害剤感受性、およびその下流の活性を評価し、その増殖抑制効果がp21を介したG1 arrestであること、さらにマウス同所性移植モデルを作成し、In vivoでの効果も確認し、この結果を論文で発表した。2については、RAS変異細胞株由来DNAを用い、デジタルPCRでの変異検出法を確立できた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
1: RMS細胞株11種類のRAS-RAF経路変異の有無とRAF-MEK阻害剤感受性、およびその下流の活性を評価し、その増殖抑制効果がp21を介したG1 arrestであること、さらにマウス同所性移植モデルを作成し、In vivoでの効果も確認し、この結果を論文で発表した。
2: RAS変異細胞株由来DNAを用い、デジタルPCRでの変異検出法を確立できた。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在のところ、予定通りRAS-RAF変異の有無とRAF-MEK阻害剤の感受性に相関が認められたため論文として発表することができた。ERKのリン酸化の程度はRAF-MEK阻害剤の感受性に関与していない可能性が示唆されたのでその原因を解明したいと考えている。
RAF-MEK阻害剤の臨床応用のためには、迅速で簡便なRAS-RAF変異の検出法の確立が重要である。我々はすでに他がん種において、遺伝子異常をデジタルPCRで検出できることを確認している。まず種々の横紋筋肉腫細胞株およびその上清を用い、デジタルPCRでのRAS-RAF変異検出法の検討を続けていく。
実験手技としては新規のものはなく、我々実験室でも日々試行しているものばかりなので問題が発生するとは考えられない。
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