2017 Fiscal Year Research-status Report

マウスを用いたアトピー性皮膚炎や魚鱗癬の胎児治療の確立

Research Project

Project/Area Number	17K10234
Research Institution	University of Fukui
Principal Investigator	知野剛直福井大学, 学術研究院医学系部門, 助教 (20521397)
Project Period (FY)	2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords	マウス胎仔治療
Outline of Annual Research Achievements	申請者のグループが作成したDMKN-β/γ欠損マウスでは、胎仔期から顆粒層などの表皮の肥厚や免疫異常が認められ、出生後に顕著な落屑やバリア機能異常が認められる。現在グループ内でDMKN-β/γの役割に関して詳細な検討を進めているが、本研究ではDMKN-β/γ欠損マウスの胎仔にDMKN-βの機能を回復しうる蛋白、ペプチド、全性能を保持する間葉系幹細胞などを投与して、胎仔治療の効果を検討する。実験方法。①リコンビナント蛋白DMKN-β、②DMKN-βの機能活性部位Glo2のペプチド、③マウス骨髄間葉系幹細胞、④マウス胎仔血液内間葉系幹細胞　をマウス胎仔循環系を通して投与予定である。解析方法。DMKN-β/γ欠損マウスにおいて、胎仔治療により出生後の皮膚バリア機能や免疫異常が改善するかどうかを確認する。①マウス新生仔の皮膚バリア機能や角化異常の解析・HE染色による組織学的検討: 顆粒層の肥厚、表皮の肥厚など・電子顕微鏡による検討: ケラトヒアリン顆粒、周辺帯、ケラチン線維束、角層のコルネオデスモゾームなどの形態学的異常・経皮水分蒸散量、角質水分量、角層透過性、天然保湿因子などの測定・免疫染色、real time PCR、Western blotーフィラグリン、ロリクリン、インボルクリンなどの発現。②マウス新生仔の皮膚免疫の解析。・免疫染色による組織学的検討: 表皮内のγδT細胞、Langerhans細胞の数。真皮のT細胞や樹状細胞の数・フローサイトメトリーによる検討: 個々のサブセットの活性化やサイトカイン産生能。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 4: Progress in research has been delayed. Reason 現在、DMKN KOマウスの皮膚の解析に時間がかかっている。皮膚バリア機能や角化異常の解析を中心に行っている。解析済み次第、本実験を主体として取り組む予定である。
Strategy for Future Research Activity	申請者のグループが作成したDMKN-β/γ欠損マウスでは、胎仔期から顆粒層などの表皮の肥厚や免疫異常が認められ、出生後に顕著な落屑やバリア機能異常が認められる。現在グループ内でDMKN-β/γの役割に関して詳細な検討を進めているが、本研究ではDMKN-β/γ欠損マウスの胎仔にDMKN-βの機能を回復しうる蛋白、ペプチド、全性能を保持する間葉解析方法。DMKN-β/γ欠損マウスにおいて、胎仔治療により出生後の皮膚バリア機能や免疫異常が改善するかどうかを確認する。①マウス新生仔の皮膚バリア機能や角化異常の解析・HE染色による組織学的検討: 顆粒層の肥厚、表皮の肥厚など・電子顕微鏡による検討: ケラトヒアリン顆粒、周辺帯、ケラチン線維束、角層のコルネオデスモゾームなどの形態学的異常・経皮水分蒸散量、角質水分量、角層透過性、天然保湿因子などの測定・免疫染色、real time PCR、Western blotーフィラグリン、ロリクリン、インボルクリンなどの発現。②マウス新生仔の皮膚免疫の解析。・免疫染色による組織学的検討: 表皮内のγδT細胞、Langerhans細胞の数。真皮のT細胞や樹状細胞の数・フローサイトメトリーによる検討: 個々のサブセットの活性化やサイトカイン産生能。順次実験を進める予定である。