2018 Fiscal Year Research-status Report
光遺伝学を用いて解析するレボドパ誘発性不随意運動におけるアストロサイトの機能関与
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17K10277
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
石田 康 宮崎大学, 医学部, 教授 (20212897)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西森 利数 宮崎大学, 医学部, 特別教授 (20112211)
蛯原 功介 宮崎大学, 医学部, 助教 (20510720)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | パーキンソン病 / L-DOPA / アストロサイト / オプトジェネティックス / 6-hydroxydopamine / 不随意運動 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1)6-hydroxydopamineによる片側パーキンソン病モデルラットの作製:三種混合麻酔薬(塩酸メデトミジン，ミダゾラム，酒石酸ブトルファノール)投与下， 脳定位的に6-OHDAを片側の内側前脳束へ微量注入することにより，中脳ドーパミン（DA）神経を化学破壊した6-OHDAラット(片側パーキンソン病モデルラット)を作製した。6-OHDA注入2週間後に，メタンフェタミン誘起回転運動を観察し行動の偏位を定量化し，一定の基準に満たなかった動物は本実験より除外した。 2)L-DOPA反復投与に伴う不随意運動の観察:L-DOPA投与に際しては，まず芳香族L-アミノ酸脱炭酸酵素阻害薬(末梢におけるL-DOPAの代謝を阻害し，L-DOPAがより効率的に脳血管関門を通過できる)のbenserazide (15 mg/kg, i.p.)，引き続きL-DOPA methyl ester (15 mg/kg, i.p.)を1日1回投与した。なお，この実験では，L-DOPA反復投与に伴う不随意運動を観察する目的で，L-DOPA投与1日，8日，15日，最終日に，各ラットのL-DOPA投与後3時間の行動観察を施行した。不 随意運動の観察には，Cenciらの提唱した評価尺度(AIMs)を用いた。 3)免疫組織化学法(免疫染色)により，片側パーキンソン病モデルラットの線条体その他の脳部位において，L-DOPA急性投与および繰り返し投与によりc-Fos，FosB等の転写調節因子が異なる様式で発現することを明らかにした。
オプトジェネティックス実験に関する予備実験は完了し，技術的の問題が概ねないことを確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ウイルスベクターを取り扱うための実験室を確保できずに，当該作業に関しては手つかずの状況であった。現在，早急に当該実験可能な環境整備を行っている。上記以外の研究内容に関しては順調に進捗している。
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| Strategy for Future Research Activity |
前項で記載したとおり，現在までウイルスベクターを取り扱うための実験室を確保できずに，当該作業に関しては手つかずの状況であった。現在，早急に当該実 験可能な環境整備を行っている。平成31年度以降は，片側パーキンソン病モデルラット作成，L-DOPA投与実験等を含め，ウイルスベクター注入等のオプトジェネティック実験も推進する予定である。
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| Causes of Carryover |
現在までウイルスベクターを取り扱うための実験室を確保できずに，当該作業に関しては手つかずの状況であった。現在，早急に当該実 験可能な環境整備を行っている。平成31年度以降は，片側パーキンソン病モデルラット作成，L-DOPA投与実験等を含め，ウイルスベクター注入等のオプトジェネティック実験も推進する予定であり，次年度以降のオプトジェネティックス実験を中心に予算を充てる予定である。
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