2018 Fiscal Year Research-status Report
アルツハイマー病危険因子と関連するDNAメチル化部位の探索とその神経変性への影響
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17K10318
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
小林 伸行 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (20385321)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | アルツハイマー病 / DNAメチル化 / エピジェネティクス / 認知症 / バイオマーカー / アルツハイマー病モデルマウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究はアルツハイマー病 (AD)を始めとした認知症性疾患において、DNAメチル化がその発症に関与しているかどうかを明らかにすることを目的としている。
前年度に続き、認知症性疾患及び健常者の研究参加のリクルートを継続し、現在までに、140名の被験者の方から協力の同意を得た。採取した血液から、DNAを精製し、バイサルファイト処理を行った。そのうち、健常者10名の血液DNAを用いて、DNAメチル化量を網羅的に測定したところ、様々な領域でDNAメチル化量が加齢によって変化することが明らかとなった。しかし、上記結果は少数例での予備的検討の結果であるため、平成31年度では、Methylation-sensitive high resolution melting (MS-HRM)法によって、検討する症例数を増やし、想定した候補領域について、結果の再現性を確認する。今後、加齢による変化がAD発症に及ぼす影響を検討する。
また、理化学研究所西道先生らの開発したADモデルマウスであるアミロイドβ(Aβ)前駆体タンパク質の遺伝子変異(APP)ノックインマウスを用いて、3、6、12月齢の脳DNAのCOASYプロモーター領域のDNAメチル化量の変化を測定した。その結果、加齢に従い、脳でCOASYプロモーター領域のDNAメチル化量が増加することが明らかとなった。野生型マウスでは、加齢による有意な変化を認めなかったことから、COASYプロモーター領域のDNAメチル化量の変化はAβ沈着による神経変性と関連することが示唆された。しかし、DNAメチル化量の変化が、COASY遺伝子発現に実際に影響を与えているかは明らかではない。そのため、平成31年度では、Real-time PCR法によって、mRNA発現量を測定し、COASY遺伝子のAD発症への関与を検討する。また、脳での変化が血液に反映されるか確認する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
疾患群のリクルートは概ね計画通りに進んでいると考えられたが、健常高齢者のリクルートがやや遅れている。しかし、そのリクルート体制を整え、平成31年度には健常高齢者の方を多くリクルートできる見込みである。
動物実験に関しては、マウスの加齢が必要であり、解析に必要な検体数を揃えるまでに、時間がかかったために、解析にやや遅れが生じている。現在、その準備はほぼ完了している。
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| Strategy for Future Research Activity |
集めた臨床検体を利用して、解析を開始する。また、動物実験の解析を引き続き行う。
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| Causes of Carryover |
本年度、研究の進捗にやや遅れが生じたため、解析に必要な費用が少なくなった。そのため、次年度に、予定された経費と合算し、臨床検体及び動物実験の解析費用として使用する予定である。
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