2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of an anti-tumor immunotherapy with the use of BCG-CWS exploiting sentinel lymph node environment
| Project/Area Number |
17K10535
|
|---|
| Research Institution | Chiba University |
|---|
Principal Investigator |
林 秀樹 千葉大学, フロンティア医工学センター, 教授 (20312960)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 憲司 千葉大学, フロンティア医工学センター, 助教 (10572985)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| Keywords | リポソーム / ジャイアントベシクル / 超音波 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では，転移性リンパ節腫瘍に対し腫瘍特異的な免疫療法を可能とする薬剤の開発を目指して，非特異的免疫活性化物質であるBCG-CWSをリポソーム製剤とすることにより粒子化し，これをジャイアントベシクル(Giant Cluster Vesicle: GCV)として凝集化し，投与部位における副作用を減弱し，超音波照射により投与部位から内包内容が放出される薬物送達システムとして機能させることを目標としている。
そこで本年度は、昨年度までに作成してきたリポソーム化BCG-CWSを内包化したGCVから、超音波照射により内包内容を放出するメカニズムの構築に必要な条件設定に研究の焦点を当てた。行った検討は以下の通りである。
(1)内包内容放出評価用GCVの作製ー内包内容の放出量の定量化に適切なマーカーとして蛍光波長570nmの量子ドット(QD)を選定、これを内包化したGCVを作製し、蛍光顕微鏡下にQDが内包されていることを確認した。(2)内包化したQDの放出が検出可能であることを確認するため、ホモジナイザーを用いGCVを完全に破壊、得た上清を蛍光光度計で計測し、コントロールにはない570nmのピーク波長を検出した。この際に得られた蛍光強度をQDの完全放出量とした。(3)臨床における使用を想定し、診断用超音波プローブを用いたQD内包GCVの破壊実験を行った。QD内包GCVのみでは破壊効率は完全破壊の数％程度であった。そこで、QD内包GCV懸濁液にマイクロバブルを添加したところ、破壊効率は完全破壊の10％程度まで上昇した。さらに脂質二重膜作製に用いるPGPRの質量％を30％下げたGCVを用いて同様の検討をしたところ、完全破壊の30％程度まで破壊効率の改善が見られた。
本年度の検討により、ほぼ臨床で使用可能なレベルの超音波誘導薬物放出システムの基礎が構築できたものと考えている。
|
