Wnt/β-cateninシグナルを標的としたトリプルネガティブ乳癌の化学予防

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K10556
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 大竹 徹 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (50363750)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡山 洋和 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (20583397) ; 立花 和之進 福島県立医科大学, 医学部, 学内講師 (50583598) ; 齋藤 元伸 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (90611749)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: Wnt/β-cateninシグナル / トリプルネガティブ乳癌

Outline of Annual Research Achievements

生物学的・臨床学的悪性度が高く、治療抵抗性であるトリプルネガティブ乳がんにおいて、Wnt/β-cateninシグナルが顕著に活性化しており、またそのシグナル異常は発がんの極めて初期段階に生じている。トリプルネガティブ乳癌におけるWnt/β-catenin
まずはじめに、Wntシグナルが標的とする炎症関連遺伝子を抽出するために、転写レベルでのWntシグナルの活性化状態を確認した。TCGA data portal、cBioPortal (MSKCC)などのアプリケーション、乳癌TCGA論文のsupplementary dataから800例以上の乳癌サンプルの各種データを取得し、MSigDB (BroadInstitute)のhallmark gene setsから、Wnt/β-cateninシグナルの活性化により発現が上昇する42遺伝子を抽出し、TCGAのRNAシークエンスデータを用いて算出した。この解析により、トリプルネガティブ乳癌は他のサブタイプの乳癌に比べ、有意にWntシグナル関連遺伝子の転写活性が高いことを確認した。
更に当科において施行した乳癌手術検体のホルマリン固定パラフィン包埋切片を用いて、β-cateninおよびその標的分子の免疫染色を行い、各種臨床病理学的因子や予後との関連を統計学的に検討している。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

Wnt/β-cateninシグナルが標的とする関連遺伝子の抽出及ぼ解析は予定通り進行しているが、手術検体を用いた免疫染色ならびに染色性の評価、臨床病理学的因子との関連性の解析が遅れている。

Strategy for Future Research Activity

当院での乳癌手術検体のホルマリン固定パラフィン包埋切片を用いて、Wnt/β-cateninシグナル関連遺伝子の免疫染色を行い、各種臨床病理学的因子や予後との関連の解析を推進する。さらに乳癌細胞株、乳癌発現モデル細胞株を用いて、siRNAによるβ-cateninのノックダウン実験およびWntシグナルを阻害するNatural compoundを投与し、転写レベル、タンパクレベルでのWntシグナル阻害を確認し、その機能を研究する。

Causes of Carryover

本年度は手術摘出標本の免疫組織染色ならびに臨床病理学的検討を行った。
研究の若干の遅れがあり、次年度より細胞株を用いた分子生物学的研究を本格的に行うため、細胞株や各種分子学的研究キット等の計上ならびに論文作成費用、国際学会、国内学会参加費用の計上が考えられる。