2018 Fiscal Year Research-status Report
Molecular mechanisms responsible for the development of acquired resistance to endocrine therapy in breast cancer
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17K10566
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| Research Institution | Kawasaki Medical School |
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Principal Investigator |
紅林 淳一 川崎医科大学, 医学部, 教授 (10248255)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森谷 卓也 川崎医科大学, 医学部, 教授 (00230160)
鹿股 直樹 川崎医科大学, 医学部, 准教授 (60263373) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 乳癌 / 内分泌療法 / 耐性 / エストロゲン枯渇 / 抗エストロゲン薬 / 低酸素 / CXCR4 / HER4 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度からエストロゲン感受性乳癌細胞株MCF-7を6カ月間以上の長期にわたり1) 低酸素培養下、2) エストロゲン枯渇下、3) 抗エストロゲン薬（4-OH-tamoxifen [4-OHT], fulvestrant [FUL]）曝露下、4) これらの組み合わせ処理下、合計8条件で細胞培養を行なった。培養開始後2カ月毎に、エストロゲン・抗エストロゲン薬に対する増殖反応性、ERシグナル伝達経路、癌幹細胞 (CSC)比率、CSC制御因子であるヘッジホッグシグナル伝達の関連因子のmRNA発現を経時的に検討した。その結果、すべて条件下で経時的にエストロゲンや抗エストロゲン薬に対する反応性の低下が観察された。興味深い所見としては、1) エストロゲン枯渇下処理により樹立された内分泌療法耐性乳癌細胞株と親株を比較したところ、エストロゲンに対するhypersensitivityとER-αの発現亢進、エストロゲン非依存的なER-αの活性化やCSC比率の増加がみられた。2) 抗エストロゲン薬FUL曝露下で樹立された内分泌療法耐性乳癌細胞株と親株を比較したところ、ヘッジホッグシグナル伝達の関連因子のmRNA発現の増加が認められた。これらの研究結果は、論文にまとめられた。さらに、エストロゲン枯渇下で樹立されたlong-term estrogen deprived (LETD)細胞やFUL耐性細胞が樹立され、親細胞とのmRNA発現をマイクロアレイで比較検討し、共通した遺伝子変化として、CXCR4, HER4の発現亢進が抽出された。現在、これらの因子の拮抗薬を用い、内分泌療法耐性の克服が可能かどうかを検討中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
8種類の条件下の長期培養実験により、複数の内分泌療法耐性乳癌細胞株が樹立され、異なるシグナル伝達の変化が観察された。さらに、LETD細胞やFUL耐性細胞が樹立され、親細胞とのmRNA発現をマイクロアレイで比較検討し、共通した遺伝子変化として、CXCR4, HER4の発現亢進が抽出された。ほぼ予定通り研究は進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度は、LETD細胞やFUL耐性細胞を用いて、1) CXCR4、HER4の安定した発現亢進の検証（定量RT-PCR法、western blot法）、2) CXCR4及びHER4阻害薬（balixafortide, neratinib, small interfering RNAなど）の細胞増殖や癌幹細胞比率（CD44/CD24 assay, Aldefluor assay, mammosphere assay）に与える影響、3) CXCR4及びHER4阻害薬の内分泌療法耐性克服の試み（阻害薬単独での抗腫瘍効果、内分泌療法の抗腫瘍効果の増強、現在臨床応用されているmTOR阻害薬、CDK4/6阻害薬の有効性の評価など）を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
mRNAマイクロアレイ解析への支出が大きかったがほぼ予定通り使用した。
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