2018 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of NASH pathogenesis by the cancer specific energy metabolic machinery regulatory gene
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17K10679
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
廣川 文鋭 大阪医科大学, 医学部, 准教授 (20322373)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高井 真司 大阪医科大学, 医学研究科, 教授 (80288703)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 非アルコール性脂肪性肝炎 / Warburg効果 / microRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、環境の欧米化に伴い脂肪肝炎の割合が増加している。さらにアルコールに依存せず肝硬変および肝細胞がん（Hepatocellular carcinoma : HCC）に進行する可能性をもつものを非アルコール性脂肪性肝炎（Non-alcoholic steatohepatitis : NASH）という。またがん細胞は有酸素下においても嫌気性解糖系でATP産生をしており、これをがん特異的エネルギー代謝機構（Warburg効果）という。本研究ではNASH発症ラットモデルを用い、Warburg効果の関連遺伝子を中心にNASH及びNASH由来肝細胞がんの病態を解明することを目的としている。
ラット及びマウスの2種の動物モデル（SHRSP5/Dmcr,C57BL/6J-NASH）に高脂肪食を与えてNASHモデルを作成し適齢週で肝臓を摘出した。摘出した肝臓をリン酸化プロテオミクス解析したところ、コントロール群と比較して回路全体の動態としてWarburg効果が活性化していることが証明された。さらに、Western Blotting法及び免疫染色法にて解析したところ、Warburg効果の律速酵素であるPKM2およびリン酸化PKM2の発現上昇を認めた。また、MIR122の発現がNASH肝において優位に低下していることを確認し、さらにLuciferase reporter assay 解析をしたところ、MIR122が直接PKM2の3'-非翻訳領域（UTR）に結合し発現を抑制していることを確認した。以上より、NASH肝においてはMIR122が低下したことでPKM2発現抑制が解除され、PKM2発現が上昇したと考えられWarburg効果が活性化していることが示唆された。
また早期飼育例（C57BL/6J-NASH）においても同様の現象が確認された。さらに、長期飼育例の肝臓においては癌化を認めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
動物モデル飼育において長期間を要したものの途中死亡などの大きな問題は認めなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
C57BL/6J-NASH長期飼育例における癌部・非癌部におけるPKM2等のWarburg関連因子の発現を評価する。またNASHにおけるmicroRNA122発現調節機構の解明を行う。
さらに、NASH患者の肝生検および手術で得られた肝標本より同等の機構が成り立つかの検証を行う。
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| Causes of Carryover |
自教室で以前より所有していた抗体・試薬を使用したため次年度使用額が生じた。次年度は新たな抗体・試薬および動物モデルの購入を予定している。
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Research Products
(2 results)
